ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:2375-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Fermentação e Biotecnologia ( Divisão J )</b><p align=justify><strong>EXPRESSÃO DO GENE L1 DE PAPILOMAVÍRUS BOVINO TIPO 1 E 4 EM LEVEDURA <EM>PICHIA PASTORIS</EM></strong></p><p align=justify><b><u>André Luiz Santos de Jesus </u></b> (<i>UFPE</i>); <b>Helder Melo de Souza </b> (<i>UFPE</i>); <b>Filipe Colaço Mariz </b> (<i>UFPE</i>); <b>Eliane Campos Coimbra </b> (<i>UFPE</i>); <b>Júlia Furtado Campos </b> (<i>UFPE</i>); <b>Marcelo Nazário Cordeiro </b> (<i>UFPE</i>); <b>Antonio Carlos de Freitas </b> (<i>UFPE</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2><P style="TEXT-ALIGN: justify; MARGIN: 0cm 0cm 6pt" class=MsoBodyTextIndent><SPAN class=conteudo1><SPAN style="FONT-SIZE: 10pt; mso-bidi-font-family: Arial"><FONT color=#333333 face=Verdana>Os papilomavírus são conhecidos por causarem lesões tumorais, geralmente benignas, em tecidos epiteliais de diversos organismos, que podem sob condições adequadas progredirem para o câncer. </FONT></SPAN></SPAN><SPAN style="FONT-FAMILY: Verdana; COLOR: #333333; FONT-SIZE: 10pt; mso-bidi-font-family: Arial">O papilomavírus bovino (BPV) tem sido amplamente caracterizado tanto por ser considerado um modelo experimental ideal para o estudo do papilomavírus humano, quanto por sua grande importância na bovinocultura, sendo associados à papilomatose cutânea, tumores na bexiga (hematúria enzoótica) e no trato digestivo superior. A papilomatose bovina, embora não caracterize um processo carcinogênico, é uma doença importante economicamente por causar desvalorização dos animais a serem comercializados. <SPAN class=conteudo1><SPAN style="mso-ansi-font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 10.0pt">A proteção contra a infecção por BPV é conferida por anticorpos neutralizantes direcionados contra a proteína do capsídeo L1. Esses anticorpos podem ser eficientemente induzidos por imunização com <I style="mso-bidi-font-style: normal">virus-like particle</I> (VLP), que são formadas espontaneamente após a expressão do gene L1 em sistemas de expressão heteróloga. A levedura <I style="mso-bidi-font-style: normal">Pichia pastoris</I> é um sistema de expressão eficiente e de baixo custo para produção de altos níveis de proteínas, além de apresentar vantagens em relação a outros sistemas. Neste trabalho foi avaliado a possibilidade do uso do sistema de expressão heteróloga baseado em células da levedura <I style="mso-bidi-font-style: normal">P. pastoris</I> para a produção da proteína L1 do capsídeo do papilomavírus bovino tipo 1 e 4. Os genes L1 foram amplificados por PCR a partir do genoma completo de BPV 1 e 4 e clonados no vetor de expressão pPICZA, sob o controle do promotor induzível <I style="mso-bidi-font-style: normal">AOX1</I>. As células de </SPAN></SPAN><I>P. pastoris</I><SPAN class=conteudo1><SPAN style="mso-ansi-font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 10.0pt"> foram transformadas com as construções pPICZAL1B1 e pPICZAL1B4 e os recombinantes </SPAN></SPAN>de <I>P. pastoris </I>obtidos <SPAN class=conteudo1><SPAN style="mso-ansi-font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 10.0pt">foram analisados para expressão do </SPAN></SPAN>gene L1 por RT-PCR e Dot blot<SPAN class=conteudo1><SPAN style="mso-ansi-font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 10.0pt">. </SPAN></SPAN>Os transformantes analisados mostraram transcrição do gene e conseqüente produção da proteína L1 de BPV <SPAN class=conteudo1><SPAN style="mso-ansi-font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 10.0pt">1 e 4, porém em baixos níveis. </SPAN></SPAN>Os resultados apresentados mostram a confirmação do uso de <I style="mso-bidi-font-style: normal">P. pastoris</I> como um sistema de expressão viável para produzir proteínas de BPV. Estes resultados, em combinação com algumas adaptações, como a otimização das sequências gênicas e da padronização da produção de proteína L1 em fermentadores, poderá aumentar a produtividade e, conseqüentemente, a produção de VLPs em larga escala.<SPAN class=conteudo1><SPAN style="mso-ansi-font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 10.0pt"><?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" /><o:p></o:p></SPAN></SPAN></SPAN></P></font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;PAPILOMAVÍRUS BOVINO, PICHIA PASTORIS, EXPRESSÃO HETERÓLOGA</td></tr></table></tr></td></table></body></html>