| Área: Genética e Biologia Molecular ( Divisão N ) EXPRESSÃO E PURIFICAÇÃO DA SEPTINA CDC12 DE PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS Thaila Reis (FMRP-USP); Paulo Coelho (FMRP-USP)
ResumoAs septinas costituem uma família de proteínas conservadas de fungos a mamíferos. Esta família de proteínas organiza-se estruturalmente formando complexos hetero-oligoméricos e se associam em filamentos na periferia celular. Septinas são caracterizadas pela presença de um domínio de ligação a GTP na região central e um domínio coiled-coil na extremidade C-terminal. No fungo leveduriforme Saccharomyces cerevisiae, as septinas desempenham função em diversos processos como citocinese, esporulação, ciclo celular e morfogênese. Neste trabalho nós identificamos uma septina do fungo termodimórfico Paracoccidioides brasiliensis, clonamos e expressamos a sequencia codificadora desta proteína, obtivemos a proteína recombinante por expressão heteróloga em Eschericchia coli e a proteína pura foi utilizada para a produção de anticorpos policlonais em coelhos. 㰀倀 猀琀礀氀攀㴀∀吀䔀堀吀ⴀ䄀䰀䤀䜀一㨀 樀甀猀琀椀昀礀㬀 吀䔀堀吀ⴀ䤀一䐀䔀一吀㨀 ㌀㔀⸀㐀㔀瀀琀㬀 䴀䄀刀䜀䤀一㨀 挀洀 挀洀 瀀琀∀ 挀氀愀猀猀㴀眀攀猀琀攀爀渀㸀㰀匀倀䄀一 猀琀礀氀攀㴀∀䘀伀一吀ⴀ匀䤀娀䔀㨀 瀀琀㬀 洀猀漀ⴀ戀椀搀椀ⴀ昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀 椀琀愀氀椀挀∀㸀䤀渀椀挀椀愀氀洀攀渀琀攀Ⰰ 瀀攀猀焀甀椀猀愀洀漀猀 甀洀 戀愀渀挀漀 搀攀 搀愀搀漀猀 搀攀 䔀匀吀 搀攀 㰀䤀㸀倀⸀ 戀爀愀猀椀氀椀攀渀猀椀猀㰀⼀䤀㸀 攀 椀搀攀渀琀椀昀椀挀愀洀漀猀 甀洀 挀氀漀渀攀 搀攀 挀䐀一䄀 挀漀洀 愀氀琀愀 栀漀洀漀氀漀最椀愀 愀 最攀渀攀猀 焀甀攀 挀漀搀椀昀椀挀愀洀 瀀愀爀愀 猀攀瀀琀椀渀愀 䌀搀挀㈀ 攀洀 㰀䤀㸀䄀猀瀀攀爀最椀氀氀甀猀 昀甀洀椀最愀琀甀猀 㰀⼀䤀㸀攀 㰀䤀㸀匀⸀ 挀攀爀攀瘀椀猀椀愀攀 㰀⼀䤀㸀⠀㤀─ 攀 㔀㤀─ 搀攀 椀搀攀渀琀椀搀愀搀攀Ⰰ 爀攀猀瀀攀挀琀椀瘀愀洀攀渀琀攀⤀⸀ 䄀 伀刀䘀 昀漀椀 愀洀瀀氀椀昀椀挀愀搀愀 瀀漀爀 倀䌀刀 攀 挀氀漀渀愀搀愀 渀漀 瘀攀琀漀爀 瀀儀䔀 ⠀儀椀愀最攀渀⤀ 瀀愀爀愀 攀砀瀀爀攀猀猀漀 攀洀 戀愀挀琀爀椀愀⸀ 䔀猀琀攀 瘀攀琀漀爀 愀搀椀挀椀漀渀愀 甀洀愀 挀愀甀搀愀 搀攀 㘀 栀椀猀琀椀搀椀渀愀猀 渀愀 瀀漀爀漀 一ⴀ琀攀爀洀椀渀愀氀 搀愀 瀀爀漀琀攀渀愀 攀砀瀀爀攀猀猀愀 愀 焀甀愀氀 瀀攀爀洀椀琀攀 愀 瀀甀爀椀昀椀挀愀漀 搀愀 瀀爀漀琀攀渀愀 搀攀 昀甀猀漀 瀀漀爀 愀昀椀渀椀搀愀搀攀 攀洀 爀攀猀椀渀愀 搀攀 渀焀甀攀氀⸀ 伀 瘀攀琀漀爀 爀攀挀漀洀戀椀渀愀渀琀攀 昀漀椀 攀氀攀琀爀漀琀爀愀渀猀昀漀爀洀愀搀漀 攀洀 挀攀瀀愀猀 搀攀 㰀䤀㸀䔀⸀ 挀漀氀椀㰀⼀䤀㸀 䴀㔀 攀 愀 攀砀瀀爀攀猀猀漀 搀愀 瀀爀漀琀攀渀愀 昀漀椀 椀渀搀甀稀椀搀愀 瀀攀氀愀 愀搀椀漀 搀攀 洀䴀 搀攀 䤀倀吀䜀 攀洀 挀甀氀琀甀爀愀猀 氀焀甀椀搀愀猀⸀ 䄀 猀攀瀀琀椀渀愀 爀攀挀漀洀戀椀渀愀渀琀攀 倀戀䌀搀挀㈀爀 昀漀椀 瀀甀爀椀昀椀挀愀搀愀 瀀漀爀 愀昀椀渀椀搀愀搀攀 攀洀 爀攀猀椀渀愀 搀攀 㰀⼀匀倀䄀一㸀㰀匀倀䄀一 猀琀礀氀攀㴀∀䘀伀一吀ⴀ匀䤀娀䔀㨀 瀀琀∀㸀一椀㰀匀唀倀㸀㈀⬀㰀⼀匀唀倀㸀 攀 椀渀樀攀琀愀搀愀 攀洀 挀漀攀氀栀漀猀 瀀愀爀愀 愀 瀀爀漀搀甀漀 搀攀 愀渀琀椀挀漀爀瀀漀猀⸀ 伀 猀漀爀漀 椀洀甀渀攀 昀漀椀 椀渀挀甀戀愀搀漀 挀漀洀 圀攀猀琀攀爀渀 戀氀漀琀 搀攀 攀砀琀爀愀琀漀 瀀爀漀琀椀挀漀 搀攀 栀椀昀愀猀 攀 氀攀瘀攀搀甀爀愀猀 搀攀 㰀䤀 猀琀礀氀攀㴀∀洀猀漀ⴀ戀椀搀椀ⴀ昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀 渀漀爀洀愀氀∀㸀倀⸀ 戀爀愀猀椀氀椀攀渀猀椀猀 攀 㰀⼀䤀㸀爀攀挀漀渀栀攀挀攀甀 甀洀愀 瀀爀漀琀攀渀愀 挀漀洀 挀攀爀挀愀 搀攀 㐀㔀欀䐀愀⸀ 䄀 椀洀甀渀漀氀漀挀愀氀椀稀愀漀 搀愀 猀攀瀀琀椀渀愀 攀洀 氀攀瘀攀搀甀爀愀猀 攀 栀椀昀愀猀 搀攀 㰀䤀 猀琀礀氀攀㴀∀洀猀漀ⴀ戀椀搀椀ⴀ昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀 渀漀爀洀愀氀∀㸀倀⸀ 㰀匀倀䄀一 猀琀礀氀攀㴀∀洀猀漀ⴀ戀椀搀椀ⴀ昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀 椀琀愀氀椀挀∀㸀戀爀愀猀椀氀椀攀渀猀椀猀㰀⼀匀倀䄀一㸀㰀⼀䤀㸀 爀攀瘀攀氀漀甀 甀洀愀 洀愀爀挀愀漀 瀀爀攀昀攀爀攀渀挀椀愀氀 渀漀 氀椀洀椀琀攀 攀渀琀爀攀 挀氀甀氀愀 洀攀 攀 挀氀甀氀愀 昀椀氀栀愀 攀 渀愀 爀攀最椀漀 搀漀 猀攀瀀琀漀Ⰰ 爀攀猀瀀攀挀琀椀瘀愀洀攀渀琀攀⸀ 㰀⼀匀倀䄀一㸀伀 愀渀琀椀挀漀爀瀀漀 瀀漀氀椀挀氀漀渀愀氀 挀漀渀琀爀愀 愀 猀攀瀀琀椀渀愀 倀戀䌀搀挀㈀ 爀攀瀀爀攀猀攀渀琀愀 甀洀愀 椀洀瀀漀爀琀愀渀琀攀 昀攀爀爀愀洀攀渀琀愀 瀀愀爀愀 漀 攀猀琀甀搀漀 搀漀 挀漀洀瀀漀爀琀愀洀攀渀琀漀 攀 漀爀最愀渀椀稀愀漀 搀攀猀琀愀 猀攀瀀琀椀渀愀 渀愀 洀漀爀昀漀最渀猀攀 搀攀 㰀䤀 猀琀礀氀攀㴀∀洀猀漀ⴀ戀椀搀椀ⴀ昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀 渀漀爀洀愀氀∀㸀倀⸀ 戀爀愀猀椀氀椀攀渀猀椀猀⸀㰀漀㨀瀀㸀㰀⼀漀㨀瀀㸀㰀⼀䤀㸀㰀⼀倀㸀
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