ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:2231-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Ecologia Microbiana ( Divisão I )</b><p align=justify><strong>ANáLISE FILOGENéTICA DE CIANOBACTéRIAS ISOLADAS DE MANGUEZAIS E AVALIAçãO DA FIXAçãO BIOLóGICA DE NITROGêNIO </strong></p><p align=justify><b><u>Diego Bonaldo Genuã¡rio </u></b> (<i>CENA/USP</i>); <b>Marli Fã¡tima Fiore </b> (<i>CENA/USP</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2>Manguezal é um ecossistema costeiro de transição entre o ambiente terrestre e aquático com alta produtividade primária, no qual a comunidade microbiana desempenha papel essencial na ciclagem de nutrientes. Muitas espécies de cianobactérias são capazes de realizar a fixação biológica do nitrogênio (FBN) contribuindo para a entrada de formas assimiláveis de N nos ecossistemas de manguezal, os quais são ambientes deficientes deste elemento. O presente trabalho visou caracterizar geneticamente as linhagens de cianobactérias isoladas de manguezais do Estado de São Paulo e investigar seu potencial de FBN. As linhagens de cianobactérias foram isoladas de dois ecossistemas de manguezais distintos, ou seja, Bertioga (impactado pelo derramamento de petróleo na década de 90) e Ilha do Cardoso (preservado). Após a extração de DNA genômico, as amostras foram amplificadas via PCR e <span style="font-style: italic;">nested </span>PCR, utilizando oligonucleotídeos iniciadores específicos para os genes <span style="font-style: italic;">rpoC1 </span>e <span style="font-style: italic;">nifH</span>, respectivamente. Em seguida, realizou os procedimentos para a clonagem e sequenciamento dos produtos da PCR. A atividade da nitrogenase redutase foi avaliada pelo método da atividade de redução de acetileno (ARA), no qual as linhagens foram incubadas por duas horas em atmosfera modificada, contendo 10% de acetileno. Alíquotas do etileno convertido foram retiradas e analisadas em cromatógrafo a gás. Fragmentos do gene <span style="font-style: italic;">rpoC1</span> e <span style="font-style: italic;">nifH</span> foram sequenciados para 21 e 10 linhagens, respectivamente, e as relações filogenéticas de cada gene foram investigadas por meio da construção de árvore filogenética. A presença do gene <span style="font-style: italic;">nifH</span> foi verificada em linhagens pertencentes as ordens Chroococcales, Oscillatoriales e Nostocales. Os resultados de ARA demostram que a capacidade para a redução do N2 atmosférico não está restrita às formas heterocitadas (Nostocales) e confirmam que as formas não heterocitadas desenvolvem estratégias alternativas para a FBN evitando os efeitos deletérios do oxigênio.<br><br><span style="font-weight: bold;">Apoio Financeiro:</span> CNPq e FAPESP<br> </font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Fixação biológica de nitrogênio, nifH, PCR nested, relações filogenéticas, rpoC1</td></tr></table></tr></td></table></body></html>