25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

ResumoID:2224-2

Área: Microbiologia Clinica ( Divisão A )

UTILIZAÇÃO DE PCR EM TEMPO REAL MULTIPLEX PARA DETECÇÃO DE PLASMODIUM VIVAX E PLASMODIUM FALCIPARUM EM COMUNIDADE RIBEIRINHA DO AMAZONAS.

Fernanda Guimarães Versiani (UFAM); Leidiane Amorim Soares (ILMD-FIOCRUZ); Alessandra Gonçalves (ILMD-FIOCRUZ); Genimar Julião (ILMD-FIOCRUZ); Maria Edilene Martins Almeida (ILMD-FIOCRUZ); Patricia Puccinelli Orlandi (ILMD-FIOCRUZ); Paulo Afonso Nogueira (ILMD-FIOCRUZ)

Resumo

A malária é a doença parasitária de maior relevância pois 131.437 mil casos foram confirmados somente no estado do Amazonas no ano de 2008. O principal método de diagnóstico é a gota espessa, com visualização dos parasitas em filme sanguíneo, porém, este método não apresenta boa sensibilidade e especificidade, sendo os métodos moleculares uma boa alternativa principalmente para os casos que apresentam baixa parasitemia e infecção mista. A utilização de PCR em tempo real para o diagnóstico de malária se mostra útil, pois ela é mais rápida em relação ao método de PCR convencional, em razão da redução de etapas e diminuição da probabilidade de contaminação. O presente trabalho propõe a utilização do PCR em tempo real para o diagnóstico de malária provocada pelas espécies de Plasmodium vivax e Plasmodium falciparum em uma única reação denominada multiplex. Efetuou-se extrações de DNA total utilizando kits comerciais de amostras de sangue provenientes da Fundação de Medicina Tropical do Amazonas, com resultados positivos para P. vivax efetuados em gota espessa, para otimização do teste de PCR em tempo real. Também foram utilizadas amostras provenientes de cultura de P. falciparum. Amostras provenientes da comunidade de Rio Pardo, situada na cidade de Presidente Figueiredo – AM, foram testadas através do método de PCR em tempo real e os resultados foram comparados com os obtidos através da gota espessa, onde observou-se que algumas apresentaram diferenças importantes: diagnóstico positivo através da PCR em tempo real enquanto a gota espessa apresentou-se negativa ou ainda a presença de infecções mistas anteriormente não diagnosticadas pela gota espessa. Através destes resultados preliminares observou-se a importância do diagnóstico correto já que o tratamento é espécie-específico, além da presença de possíveis casos assintomáticos possibilitando a permanência de potenciais reservatórios com manutenção da transmissibilidade na região. Daremos prosseguimento ao estudo analisando outros aspectos relacionados à epidemiologia da infecção na comunidade de Rio Pardo, e aperfeiçoamento da técnica de PCR em tempo real para detecção de espécies de Plasmodium sp.

Palavras-chave: Real Timer, Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Epidemiologia molecular, Multiplex

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