ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:2201-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Genética e Biologia Molecular ( Divisão N )</b><p align=justify><strong> ESTUDO DE COMPLEMENTAÇÃO FUNCIONAL DE <EM>RAD51</EM> E <EM>RAD52</EM> DE <EM>SACCHAROMYCES CEREVISIAE</EM> POR <EM>RADA</EM> DE <EM>HALOBACTERIUM SALINARUM</EM> </strong></p><p align=justify><b><u>Carla Renata Santos </u></b> (<i>UFMG</i>); <b>Sávio Torres de Farias </b> (<i>UFPA</i>); <b>Mônica Bucciarelli Rodriguez </b> (<i>UFMG</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2> <link rel="File-List" href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Clgm%5CCONFIG%7E1%5CTemp%5Cmsohtml1%5C01%5Cclip_filelist.xml"><!--[if gte mso 9]><xml> <w:WordDocument> <w:View>Normal</w:View> <w:Zoom>0</w:Zoom> <w:HyphenationZone>21</w:HyphenationZone> <w:PunctuationKerning/> <w:ValidateAgainstSchemas/> <w:SaveIfXMLInvalid>false</w:SaveIfXMLInvalid> <w:IgnoreMixedContent>false</w:IgnoreMixedContent> <w:AlwaysShowPlaceholderText>false</w:AlwaysShowPlaceholderText> <w:Compatibility> <w:BreakWrappedTables/> <w:SnapToGridInCell/> <w:WrapTextWithPunct/> <w:UseAsianBreakRules/> <w:DontGrowAutofit/> </w:Compatibility> <w:BrowserLevel>MicrosoftInternetExplorer4</w:BrowserLevel> </w:WordDocument> </xml><![endif]--><!--[if gte mso 9]><xml> <w:LatentStyles DefLockedState="false" LatentStyleCount="156"> </w:LatentStyles> </xml><![endif]--><style> <!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:10.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> </style><!--[if gte mso 10]> <style> /* Style Definitions */ table.MsoNormalTable {mso-style-name:"Tabela normal"; mso-tstyle-rowband-size:0; mso-tstyle-colband-size:0; mso-style-noshow:yes; mso-style-parent:""; mso-padding-alt:0cm 5.4pt 0cm 5.4pt; mso-para-margin:0cm; mso-para-margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:10.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:#0400; mso-fareast-language:#0400; mso-bidi-language:#0400;} </style> <![endif]--> <p class="MsoNormal" style="text-align: justify; line-height: 150%;"><span style=""><font size="3"><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">A proteína RadA de arqueia e sua homóloga eucariótica Rad51 são recombinases que atuam no reparo de quebras duplas no DNA por recombinação homóloga e pertencem à família de proteínas Rad51/RecA/RadA. Estas proteínas são importantes na manutenção da estabilidade genômica. Estudos realizados </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">in silico</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;"> com as proteínas RadA de </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">Halobacterium salinarum </i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">e Rad51 de </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">Saccharomyces cerevisiae</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;"> mostraram grande similaridade estrutural e conservação espacial de resíduos de aminoácidos essenciais para a atividade de Rad51 no sistema de reparo de DNA. Estes resultados sugeriam a possibilidade de complementação funcional em leveduras deficientes em Rad51 pela expressão de RadA. Com o objetivo de testar esta hipótese, os genes </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">radA</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">, </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">RAD51 </i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">e </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">RAD52 </i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">foram amplificados por reação de PCR utilizando-se iniciadores desenhados a partir de sequências disponíveis no GeneBank e clonados em vetores de expressão em leveduras (pYES2). Leveduras mutantes para os genes </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">rad52</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;"> e </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">rad51</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">, bem como selvagens para estes genes, foram transformadas com os plasmídios: pYES, pYES-</span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">radA</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">, pYES-</span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">RAD51</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;"> e pYES-</span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">RAD52</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">. Para avaliar a capacidade de complementação funcional </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">in vivo</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">, foram realizados ensaios de sobrevivência das leveduras transformadas ao metilmetanosulfonato (MMS). A capacidade de parte da população das leveduras mutantes </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">rad51</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">, expressando </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">radA </i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">de </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">H. salinarum</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;"> de sobreviver à exposição ao MMS foi um indicativo de que RadA é capaz de complementar parcialmente a função Rad51 no reparo de DNA. A complementação funcional não foi observada em leveduras </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">rad52</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;"> expressando </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">radA </i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">de </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">H. salinarum</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">. Estes dados indicam que a supressão da mutação de </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">rad51</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;"> por </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">radA </i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">é específica, uma vez que mesmo sendo super-expresso </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">radA</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;"> não foi capaz de complementar a mutação em&nbsp; </span><i style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">rad52</i><span style="font-family: Times New Roman,Times,serif;">.</span></font><o:p></o:p></span></p> </font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Halobacterium salinarum, radA, rad51, rad52, Saccharomyces cerevisiae</td></tr></table></tr></td></table></body></html>