25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

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Thiago Oliveira dos Santos (Instituto Butantan); Franciely Paula Toniolo de Paiva (Instituto Butantan); Tatiane Marques Porangaba (Instituto Butantan); Marcia Regina Franzolin (Instituto Butantan); Marcelo Palma Sircili (Instituto Butantan)

A diarréia continua a ser uma das causas mais comuns de morbidade e mortalidade em crianças e lactentes, especialmente nos países em desenvolvimento. A definição de Escherichia coli enteropatogênica atípica (EPEC atípica) foi criada em 1995 para denominar amostras de E. coli diarreiogênicas que diferem das EPEC típicas por não transportarem o plasmídio EPEC adherence factor (EAF) e das Escherichia coli enterohemorrágicas (EHEC), por não produzirem a toxina stx. Até o momento não foi descrito nenhum fator de virulência exclusivo das EPEC atípicas, pelo contrário, todos os fatores de virulência encontrados têm sido comuns a outros patótipos, mesmo distantes. O presente trabalho verificou a presença dos seguintes genes de virulência: efa1/lifA, pic, pet, ldaH, astA, hly, sat, toxB, ehly1, ehly2, sheA, cdt e saa em 72 amostras de EPEC atípicas. As amostras de DNA utilizadas na PCR foram obtidas através de amostras de EPEC atípicas incubadas por aproximadamente 18 horas, ressuspendidas em 500 ul de água ultra pura, aquecidas a 100ºC por 10 minutos e incubadas a 0ºC por 10 minutos. Na reação de PCR foram utilizados pares de primers específicos de cada gene e na técnica de southern blotting foram utilizadas sondas específicas para cada gene. A amplificação do fragmento foi detectada por eletroforese em gel de agarose 1%, posteriormente corado com brometo de etídio. Os resultados obtidos na PCR foram confirmados através de southern blotting e sequenciamento genético. Os genes astA e sheA foram os mais detectados, em contrapartida os genes cdt, ehly2 e saa, não foram detectados em nenhuma das amostras estudadas. Portanto, das 72 amostras analisadas, o gene hly esta presente em 0,83%, pic 1,67%, toxB 2,5%, pet 4,17%, 6,67%, ldaHehly1 5%, efa 14,7%, sat 18,83%, astA 32,5%, sheA 56,9%, cdt, ehly2 e saa 0%. Baseando-se nos resultados, podemos dizer que algumas amostras de EPEC atípicas possuem fatores de virulência comuns a outros patótipos de E. coli diarreiogênicas, confirmando a teoria de que as EPEC atípicas fazem parte de um grupo bastante heterogêneo.

Suporte Financeiro: FAPESP, CNPq