ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:2069-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Genética e Biologia Molecular ( Divisão N )</b><p align=justify><strong><FONT SIZE="4">ANÁLISE DO SÍTIO DE INÍCIO DE TRANSCRIÇÃO DE GENES DE <SPAN STYLE="FONT-STYLE: ITALIC;">MYCOPLASMA HYOPNEUMONIAE</SPAN>: CARACTERIZAÇÃO DE PROMOTORES</FONT><O:P></O:P><P></P> </strong></p><p align=justify><b>Shana de Souto Weber </b> (<i>UFRGS</i>); <b>Irene Silveira Schrank </b> (<i>UFRGS</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2><i style="">Mycoplasma hyopneumoniae</i> (MH) é uma das menores bactérias encontradas na natureza, apresentando genoma altamente reduzido e ausência de parede celular. Este organismo é o agente causador da pneumonia enzoótica suína, a qual apresenta distribuição mundial causando importantes perdas econômicas. Na última década, várias espécies de <i style="">Mycoplasma</i> tiveram seus genomas completamente seqüenciados, incluindo três cepas de MH. Apesar da grande quantidade de dados gerados, pouco se sabe sobre as seqüências nucleotídicas que controlam o início da transcrição nestes microrganismos. A grande variabilidade encontrada nas regiões promotoras, o baixo conteúdo de GC presente no genoma e a carência de promotores experimentalmente caracterizados, são fatores que dificultam o reconhecimento <i style="">in silico </i>das seqüências reguladoras no gênero Mycoplasma. Sendo assim, este trabalho pretende definir, através da técnica de RLM-RACE (<i style="">RNA Ligase Mediated Rapid Amplification of cDNA Ends</i>), o sítio de início de transcrição de alguns genes de <i style="">M. hyopneumoniae</i>, possibilitando, dessa forma, a análise das regiões localizadas a <st1:metricconverter productid="5 " w:st="on"><span style=""><span style="">5 </span></span></st1:metricconverter><span style=""><span style=""> e <st1:metricconverter productid="3 " w:st="on">3 </st1:metricconverter>. Inicialmente, estão sendo analisados os transcritos de genes que codificam proteínas antigênicas e proteínas ribossomais. Também serão examinados o sítio de início de transcrição de diversos operons. A partir da utilização de <i style="">primers</i> específicos e de RNA total extraído de MH linhagem 7448, cultivado a <st1:metricconverter productid="37&#65456;C" w:st="on">37°C</st1:metricconverter> em meio padrão Friis, foram feitos experimentos de RT-PCR e RLM-RACE.<span style="">&nbsp; </span>Até o momento, seis genes tiveram a transcrição confirmada por RT-PCR; destes, cinco tiveram o seu sítio +1 determinado. Resultados preliminares mostram que os sítios de início de transcrição encontrados localizam-se entre <st1:metricconverter productid="28 a" w:st="on">28 a</st1:metricconverter> 69 pares de base de distância do códon de início de tradução, havendo preferência por adeninas e guaninas. Além disso, nos dois genes verificados até o momento, foram observadas possíveis seqüências promotoras na região -10, enquanto uma provável região -35 foi localizada em apenas um deles. A análise das regiões adjacentes ao +1 dos demais genes está sendo realizada na tentativa de caracterizar os elementos promotores. <o:p></o:p></span></span><p></p> </font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Mycoplasma hyopneumoniae, Mycoplasma, promotores, transcrição, sítio início transcrição</td></tr></table></tr></td></table></body></html>