ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:2043-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Patogenicidade Microbiana ( Divisão D )</b><p align=justify><strong><P ALIGN=CENTER>EFEITO DO INTERFERON GAMA SOBRE A MATURAÇÃO DE VACÚOLOS CONTENDO ESTREPTOCOCOS DO GRUPO B EM CÉLULAS ENDOTELIAIS HUMANAS</P></strong></p><p align=justify><b><u>Viviane de Oliveira Freitas Lione </u></b> (<i>Unifesp</i>); <b>Marcele Marcolino França </b> (<i>DBCel</i>); <b>Prescilla Emy Nagao Ferreira </b> (<i>DBCel</i>); <b>Renato Arruda Mortara </b> (<i>Unifesp</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2><P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify; tab-stops: 91.5pt"><B style="mso-bidi-font-weight: normal"><SPAN style="COLOR: red">Introdução: </SPAN></B>Durante o desenvolvimento de infecções, patógenos são capazes de romper barreiras impostas pelo hospedeiro, constituídas por células epiteliais, endoteliais e suas lâminas basais. Para ultrapassar essas barreiras, muitos microrganismos patogênicos, em particular, os Estreptococos do grupo B (EGB), devem elaborar mecanismos eficazes de adesão a esses substratos, degradação tecidual e de invasão celular. Tendo em vista a importância dos estreptococos do grupo B nas infecções humanas e, do pouco conhecimento sobre os mecanismos moleculares pelo qual esta bactéria causa doenças e evade do ataque do sistema imune, o principal objetivo deste trabalho foi investigar a influência do IFN-<SPAN lang=EN-US style="FONT-FAMILY: Symbol; mso-ansi-language: EN-US; mso-ascii-font-family: 'Times New Roman'; mso-hansi-font-family: 'Times New Roman'; mso-char-type: symbol; mso-symbol-font-family: Symbol"><SPAN style="mso-char-type: symbol; mso-symbol-font-family: Symbol">g</SPAN></SPAN><SPAN lang=EN-US> </SPAN>no processo de interação entre EGB - células endoteliais. </P> <P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><B style="mso-bidi-font-weight: normal"><SPAN style="COLOR: red">Metodologia:</SPAN> </B>Monocamada confluente de HUVEC<SPAN style="COLOR: red"> </SPAN>foi tratada com IFN-<SPAN lang=EN-US style="FONT-FAMILY: Symbol; mso-ansi-language: EN-US; mso-ascii-font-family: 'Times New Roman'; mso-hansi-font-family: 'Times New Roman'; mso-char-type: symbol; mso-symbol-font-family: Symbol"><SPAN style="mso-char-type: symbol; mso-symbol-font-family: Symbol">g</SPAN></SPAN><SPAN lang=EN-US> </SPAN>e infectadas com EGB, objetivando os ensaios de adesão, invasão e viabilidade intracelular, realizados através do método de exclusão da gentamicina/penicilina. Além disso, a persistência bacteriana foi contabilizada através de microscopia óptica. Após invasão, foi realizada transfecção das células endoteliais para RAB5 (marcador de endossomo precoce) e marcação com anticorpo monoclonal para&nbsp;LAMP-1 (marcador de endossomo tardio), para acompanharmos a maturação dos vacúolos endoteliais contendo o EGB por microscopia de fluorescência e microscopia confocal a laser.</P> <P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><B style="mso-bidi-font-weight: normal"><SPAN style="COLOR: red">Resultados:</SPAN></B><SPAN style="COLOR: red"><SPAN style="mso-tab-count: 1">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </SPAN></SPAN>O IFN-<SPAN lang=EN-US style="FONT-FAMILY: Symbol; mso-ansi-language: EN-US; mso-ascii-font-family: 'Times New Roman'; mso-hansi-font-family: 'Times New Roman'; mso-char-type: symbol; mso-symbol-font-family: Symbol"><SPAN style="mso-char-type: symbol; mso-symbol-font-family: Symbol">g</SPAN></SPAN> reduziu a aderência dos EGB às HUVECs até 1h, no entanto, observamos um aumento após 2h de incubação. Além disso, a invasão bacteriana&nbsp;aumentou após 0,5h de interação, apresentando maior pico em 2h. Por outro lado,<B> </B><SPAN style="mso-bidi-font-weight: bold">a</SPAN> sobrevivência da amostra 90356/líquor-III foi parcialmente reduzida pelo IFN-<SPAN lang=EN-US style="FONT-FAMILY: Symbol; mso-ansi-language: EN-US; mso-ascii-font-family: 'Times New Roman'; mso-hansi-font-family: 'Times New Roman'; mso-char-type: symbol; mso-symbol-font-family: Symbol"><SPAN style="mso-char-type: symbol; mso-symbol-font-family: Symbol">g</SPAN></SPAN>, principalmente após 1h,&nbsp;chegando aproximadamente a 40% da sobrevivência intracelular em 24h. Em paralelo, após endocitose, os vacúolos contendo EGB adquiriram RAB5 nas primeiras 0,5h, após invasão bacteriana do endotélio, com diminuição em 1h. Além disso, os vacúolos adquiriram o marcador LAMP-1, principalmente após 2h de incubação com o microrganismo. Estes resultados indicam pela primeira vez que os vacúolos endoteliais contendo EGB estão sofrendo processo de maturação ao longo do tempo, com aquisição de marcadores tanto de endossomo precoce quanto de endossomo tardio.<SPAN style="mso-tab-count: 1"> </SPAN></P> <P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><B style="mso-bidi-font-weight: normal"><SPAN style="COLOR: red">Conclusões:</SPAN></B><SPAN style="COLOR: red"> </SPAN>O EGB foi capaz de aderir, invadir e sobreviver no interior das células endoteliais estimuladas com IFN-<SPAN lang=EN-US style="FONT-FAMILY: Symbol; mso-ansi-language: EN-US; mso-ascii-font-family: 'Times New Roman'; mso-hansi-font-family: 'Times New Roman'; mso-char-type: symbol; mso-symbol-font-family: Symbol"><SPAN style="mso-char-type: symbol; mso-symbol-font-family: Symbol">g</SPAN></SPAN> e esta citocina aumenta o processo de maturação dos fagossomos endoteliais contendo a bactéria.</P> <P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><B style="mso-bidi-font-weight: normal"><SPAN style="COLOR: red">Financiamento:</SPAN></B> FAPERJ, FAPESP, CAPES e CNPq.</P></font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;ESTREPTOCOCOS DO GRUPO B, CÉLULAS ENDOTELIAIS, INTERFERON GAMA, MARCADORES ENDOSSOMAIS</td></tr></table></tr></td></table></body></html>