VALIDAÇÃO DE MÉTODO MICROBIOLÓGICO PARA ANÁLISE DE FLUCLOXACILINA

Flávia Angélica Másquio Fiorentino (UNESP); Hérida Regina Nunes Salgado (UNESP)

Introdução: Flucloxacilina (FCX), penicilina semissintética resistente à penicilinase estafilocócica principalmente produzida por Staphylococcus aureus, é pertencente às isoxazolilpenicilinas. Seu uso é preferível ao uso de glicopeptídeos para infecções causadas por MSSA. O controle de qualidade utilizando método de análise microbiológica é descrito para diversos antimicrobianos, pois permite verificar a potência do produto frente a um micro-organismo. Objetivo: foi desenvolver e validar um método microbiológico para análise de FCX em cápsulas, utilizando S. aureus como micro-organismo indicador. Método: S. aureus ATCC 6538 cultivado em ágar casoy foi mantido a 8 ^oC. Foi realizada uma suspensão da cultura em caldo BHI 24 h antes do ensaio, mantida em 35 ± 2 ºC. Esta suspensão foi ajustada para fornecer 25 ± 2% de transmitância em espectrofotômetro a 580 nm, utilizando célula de 10 mm de diâmetro e caldo BHI como branco. 0,5 mL de caldo BHI inoculado foram adicionadas a 50 mL de ágar de Grove Randal número 1 para antibióticos a 35 ± 2 ºC e foi utilizado como camada de superfície. Para a camada base, foram transferidos para placa de Petri 20 mL de ágar de Grove Randal número 1 para antibióticos. Após a solidificação, porções de 5 mL de ágar de superfície inoculado com o S. aureus foram adicionadas à camada base. A distribuição das soluções foi feita nos orifícios de templates estéreis de aço inoxidável, colocados na superfície do meio inoculado. Foi utilizado o delineamento 3 x 3. Três poços foram preenchidos com 200 µL de solução de substância química de referência (SQR) e três poços foram preenchidos com 200 µL de solução amostra, nas mesmas concentrações das soluções de SQR. Após a incubação, o diâmetro da zona de inibição de crescimento foi medido com paquímetro digital. Resultados: A potência de FCX foi 94,33 %. O método foi validado de acordo com os parâmetros de linearidade com coeficiente de correlação do padrão (r = 0,9997) e coeficiente de correlação da amostra (r = 1,0), exatidão (recuperação = 98,96%), precisão (DPR = 2,72%) e os resultados foram estatisticamente analisados pela análise de variância. Conclusão: O método validado é plenamente satisfatório para a determinação da potência de FCX em cápsulas e demonstrou ser uma técnica simples, de baixo custo e de fácil execução.