UTILIZAÇÃO DA PCR EM TEMPO REAL PARA O DIAGNÓSTICO LABORATORIAL RÁPIDO DAS MENINGITES BACTERIANAS

Lucila Okuyama Fukasawa (IAL); Maria Gisele Gonçalves (IAL); Maristela Marques Salgado (IAL); Terezinha Pereira de Araújo (IAL); Anna Vera Custódio (IAL); Lee H Harrison (Pitt); Claudio Tavares Sacchi (IAL)

No Brasil, apenas 50% dos casos de meningites bacterianas (MB) são confirmadas por técnicas laboratoriais como a cultura, a contraimunoeletroforese (CIE) e o teste de aglutinação do látex. Esta baixa positividade está relacionada a diversos fatores inerentes a estas técnicas, tais como transporte e acondicionamento inadequados da amostra, coleta após a introdução de antibioticoterapia e sensibilidades limitadas dependente da concentração de bactérias na amostra. Desta forma, é fundamental dispor de técnicas laboratoriais que apresentem alta sensibilidade e especificidade e que não apresentem interferência da presença de antibiótico na amostra. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo avaliar o uso da técnica de PCR em tempo real (RT-PCR) no diagnóstico laboratorial das meningites causadas por Neisseria meningitidis (Men), Streptococcus pneumoniae (Spn) e Haemophilus influenzae (Hi) em amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes do município de São Paulo durante o período de junho de 2007 a junho de 2009. Foram empregadas reações de RT-PCR (sistema TaqMan^®) em formato multiplex para a detecção simultânea de Men, Hi e Spn e em formatos single para a determinação dos genogrupos (A, B, C, W135 ou Y) de Men ou dos genotipos (a, b, c, d, e, f) de Hi. Foram avaliadas no período 1407 amostras de LCR, sendo que 350 foram positivas para Men (25%), 148 para Spn (10,5%) e 34 para Hi (2,5%). Entre as amostras de LCR positivas para Men, 75% foram positivas para MenC, 13% para MenB, 7% para MenW135, 1% para MenY e 4% foram negativas (não-genogrupáveis). Entre as amostras de LCR positivas para Hi, 88% foram positivas para o genotipo b (Hib), 6% para o genotipo a (Hia) e 6% foram não-genotipáveis. Os resultados do presente trabalho indicaram que: (a) Men foi a principal bactéria causadora de MB, seguido pelo Spn; (b) o genogrupo C de Men foi o prevalente entre as amostras analisadas; (c) o genotipo b (Hib) foi o mais prevalente entre as amostras Hi positivas; (d) a técnica de RT-PCR pode ser empregada para o diagnóstico laboratorial rápido das meningites causadas por Men, Spn ou Hi, bem como para a identificação dos genogrupos de Men ou genotipos de Hi.