TRIAGEM DE BIBLIOTECAS METAGENÔMICAS PARA OBTENÇÃO DE CLONES COM ATIVIDADE DE FITASE਀㰀⼀猀琀爀漀渀最㸀㰀⼀瀀㸀㰀瀀 愀氀椀最渀㴀樀甀猀琀椀昀礀㸀㰀戀㸀䰀甀挀愀猀 匀椀氀瘀愀 䌀愀爀瘀愀氀栀漀 㰀⼀戀㸀  ⠀㰀椀㸀唀䌀䈀㰀⼀椀㸀⤀㬀 㰀戀㸀䈀攀琀愀渀椀愀  䘀攀爀爀愀稀 儀甀椀爀椀渀漀 㰀⼀戀㸀  ⠀㰀椀㸀䔀洀戀爀愀瀀愀 䄀最爀漀攀渀攀爀最椀愀㰀⼀椀㸀⤀㬀 㰀戀㸀䨀愀渀愀椀渀愀  䘀攀爀渀愀渀搀攀猀 搀攀 䄀爀愀切樀漀 㰀⼀戀㸀  ⠀㰀椀㸀唀䌀䈀㰀⼀椀㸀⤀㬀 㰀戀㸀刀椀挀愀爀搀漀  䠀攀渀爀椀焀甀攀 䬀爀ﰀ最攀爀 㰀⼀戀㸀  ⠀㰀椀㸀唀渀䈀㰀⼀椀㸀⤀㰀戀爀㸀㰀戀爀㸀㰀⼀瀀㸀㰀戀㸀㰀昀漀渀琀 猀椀稀攀㴀㈀㸀刀攀猀甀洀漀㰀⼀昀漀渀琀㸀㰀⼀戀㸀㰀瀀 愀氀椀最渀㴀樀甀猀琀椀昀礀 挀氀愀猀猀㴀琀爀攀猀㸀㰀昀漀渀琀 猀椀稀攀㴀㈀㸀 A diversidade microbiana que inclui organismos cultiváveis e não cultiváveis pode ser explorada para fins biotecnológicos por meio de técnicas moleculares. A abordagem metagenômica possibilita extração e clonagem do DNA de uma microbiota de interesse sem haver necessidade de cultivo. Bibliotecas metagenômicas de expressão podem ser utilizadas para explorar a diversidade metabólica de comunidades bacterianas através de sua triagem para atividades catalíticas de interesse. No processo de produção de biodiesel a partir da prensagem de sementes oleaginosas há formação de uma torta residual que frequentemente não é adequada para alimentação de animais monogástricos dada a presença de fitato em sua composição. A fitase é uma enzima capaz de eliminar o fitato que é um complexo de inositol e fosfato. Neste trabalho, bibliotecas metagenômicas de expressão de pequenos insertos (inserto mediano de 8kb), provenientes de DNA metagenômico de rúmen de caprino e solo de cerrado sensu stricto, foram triadas na busca de clones que apresentassem atividade de fitase. Para isto foram utilizados protocolos de screening em meios de cultura específicos para identificação de clones com esta atividade. Inicialmente as bibliotecas são plaqueadas em meio contendo 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate (X-phosphate) que se liga ao complexo enzimático de fosfatases deixando as colônias azuis. Seguidamente a este screening será feito um ensaio com molibidato de amônio e fitato de sódio com os clones positivos, o molibidato de amônio na presença de fosfatases forma um complexo azul que pode ser mensurado por espectrofotometria em 620 nm e a curva de calibração será feita com Aspergillusficum. Os resultados desta seleção de clones ativos para fitase bem como a análise preliminar dos clones positivos serão mostrados. ਀㰀⼀昀漀渀琀㸀㰀⼀瀀㸀㰀戀爀㸀㰀戀㸀倀愀氀愀瘀爀愀猀ⴀ挀栀愀瘀攀㨀 㰀⼀戀㸀☀渀戀猀瀀㬀挀攀爀爀愀搀漀 猀攀渀猀甀 猀琀爀椀挀琀漀Ⰰ 挀漀洀甀渀椀搀愀搀攀猀 戀愀挀琀攀爀椀愀渀愀猀Ⰰ 昀椀琀愀猀攀Ⰰ 洀攀琀愀最攀渀洀椀挀愀Ⰰ 爀切洀攀渀 搀攀 挀愀瀀爀椀渀漀猀㰀⼀琀搀㸀㰀⼀琀爀㸀㰀⼀琀愀戀氀攀㸀㰀⼀琀爀㸀㰀⼀琀搀㸀㰀⼀琀愀戀氀攀㸀㰀⼀戀漀搀礀㸀㰀⼀栀琀洀氀㸀