25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

DESENVOLVIMENTO DE UMA VACINA CONTRA ESCHERICHIA COLI DIARREIOGÊNICA UTILIZANDO O ANTÍGENO O111 DE LPS
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Maurilio Fernandes dos Santos (IBU); Gabrielle Ribeiro de Andrade (IBU); Christiane Yumi Ozaki (IBU); Marta de Oliveira Domingos (IBU)

Introdução: A melhor abordagem para o desenvolvimento de uma vacina contra E.scherichia coli diarreiogênicas pertencentes ao sorogrupo O111 que apresentam diferentes mecanismos de virulência entre si é a molécula de LPS.Duas partes da molécula de LPS, o polissacarídeo O111 e o cerne podem ser usados como antígenos para vacinação e imunoterapia. No entanto, variações estruturais encontradas em ambas as partes podem dificultar a formulação de uma vacina eficaz que combata todas as categorias dos patógenos pertencentes ao sorogrupo O111. Além disso, a capacidade de anticorpos contra E.coli O111 em reconhecer, inibir e estimular a eliminação de bactérias O111 por macrófagos foi investigada. Objetivo: O objetivo deste trabalho é verificar se o cerne e o polissacarídeo da molécula de LPS são bons candidatos de antígeno na construção de uma vacina contra EHEC, EPEC e EAEC. Metodologia: Análises sorológicas, moleculares e de cromatografia gasosa foram empregadas para determinar se as variantes antigênicas presentes no cerne da molécula de LPS e no polissacarídeo O111 possuem elementos em comum que possam ser usados para a imunoterapia. Resultados: Os dados obtidos neste trabalho, a partir da análise de cromatografia gasosa, demonstraram que polissacarídeo O111ab derivado de EHEC e polissacarídeo O111ac de EPEC atípica possuem diferentes razões molares de açúcar, sugerindo que a quantidade de unidades repetitivas de oligossacarídeos presentes nestas amostras são diferentes umas das outras. Entretanto, as análises de immunoblotting dos dois subtipos de O111 mostraram que os anticorpos gerados contra polissacarídeo O111ab ou O111ac são capazes de reconhecer EPEC, EHEC e EAEC independentemente do subtipo, ab ou ac. Foi verificado que anticorpos produzidos em coelhos imunizados com a amostra capsulada O111:H- de EHEC foram capazes de reconhecer, agregar e inibir a adesão à células epiteliais humanas de todas as categorias de bactérias pertencentes ao sororupo O111, independentemente de seu antígeno flagelar ou mecanismo de virulência. Além disso, esses anticorpos também foram capazes de aumentar a eliminação de E.coli O111 por macrófagos. Em relação ao cerne de LPS, as análises de PCR das vias envolvidas na sua biossíntese, mostraram que as amostras de EAEC do sorogrupo O111 possuem cerne tipo R2, enquanto que as amostras de EPEC típica e EHEC possuem cerne do tipo R3. Em contrapartida, as amostras de EPEC atípicas têm cerne do tipo R2 a R3. Conclusão: Os resultados apresentados indicam que apesar das diferenças encontradas no polissacarídeo O111 do LPS, este ainda é um bom candidato a antígeno para o desenvolvimento de uma vacina contra as três categorias de E.coli diarreiogênicas pertencentes ao sorogrupo O111. A utilização dos cernes tipo R2 e R3 como antígeno na formulação de uma vacina pode gerar anticorpos contra as três categorias de E.coli diarreiogênicas pertencentes ao sorogrupo O111: EPEC típica e atípica, EHEC e EAEC.਀