AVALIAÇÃO QUANTITATIVA DE BACTEROIDES FRAGILIS ENTEROTOXIGÊNICO E DE CLOSTRIDIUM DIFFICILE EM CRIANÇAS COM DIARRÉIA AGUDA NA CIDADE DE SÃO PAULO, SP, BRASIL.

Victor Rafael Castillo Merino (ICB II / USP); Viviane Nakano (ICB II / USP); Mario Julio Avila-campos (ICB II / USP)

Bacteroides fragilis faz parte da microbiota indígena do trato gastrointestinal de humanos e animais, e algumas cepas estão associadas à diarréia aguda devido à produção da metaloprotease fragilisina, sendo denominadas B. fragilis enterotoxigênicas (ETBF). Clostridium difficile também forma parte da microbiota intestinal, e representa importante agente etiológico da diarréia associada à antibioticoterapia e à diarréia nosocomial. Processos diarréicos agudos apresentam elevados índices de morbidade e mortalidade em crianças menores de cinco anos em nível mundial, incluindo o Brasil. O presente estudo visou avaliar quantitativamente as espécies ETBF e de C. difficile em crianças imunocompetentes com e sem diarréia aguda. 110 amostras fecais diarréicas e 150 amostras fecais normais de crianças imunocompetentes, de 0 a 5 anos de idade foram selecionadas para este trabalho. O DNA bacteriano foi obtido pelo kit comercial. A avaliação quantitativa foi realizada pela técnica RT-PCR com o sistema Taqman. Das 110 amostras diarréicas, 12 (10,9%) foram positivas para ETBF e 20 (18,18%) para C. difficile. No grupo controle foi detectado 21 (14%) amostras positivas para ETBF e 35 (23,3%) para C. difficile. Também, neste grupo controle, foram observadas 4 amostras positivas para ETBF e C. difficile. Já nas amostras diarréicas somente uma foi positiva para ambas as espécies estudadas e o número de cópias de DNA de ETBF foi superior (2,7 x 10⁵) àqueles observados nas 4 amostras fecais não diarréicas (≤2 x 10²). Nossos resultados sugerem que C. difficile é predominante nos processos diarréicos e não diarréicos, e que existe algum sinergismo entre as bactérias estudadas nesse ecossistema, ou que exista a participação de outros microrganismos diarreiogênicos não avaliados neste estudo. Devido a sua especificidade, sensibilidade e rapidez, a técnica do RT-PCR constitui-se uma ferramenta eficaz para o diagnóstico clínico da diarréia aguda.