ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:1769-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Genética e Biologia Molecular ( Divisão N )</b><p align=justify><strong>CARACTERIZAÇÃO DE GENES QUE CODIFICAM PARA DIGUANILATO CICLASE/FOSFODIESTERASE E PARA A PROTEÍNA DNAK DE&NBSP;<SPAN STYLE="FONT-STYLE: ITALIC">AZOSPIRILLUM AMAZONENSE </SPAN></strong></p><p align=justify><b><u>Dieime de Souza Andrade </u></b> (<i>UFRGS</i>); <b>Fernando Hayashi Sant'anna </b> (<i>UFRGS</i>); <b>Débora Brock Trentini </b> (<i>UFRGS</i>); <b>Irene Silveira Schrank </b> (<i>UFRGS</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2>&nbsp; <P style="MARGIN-BOTTOM: 0cm" class=western><FONT face="Times New Roman, Times, serif">Danos ambientais causados pelo uso indiscriminado de fertilizantes são bem estabelecidos. Portanto, métodos alternativos de fertilização para o desenvolvimento de uma agricultura sustentável são necessários. A bactéria diazotrófica de solo <EM>Azospirillum amazonense</EM> possui potencial para ser utilizada como biofertilizante, pois promove o crescimento de vegetais de importância econômica, como trigo e arroz. Entretanto, os mecanismos que propiciam esta característica foram pouco estudados nesta espécie.</FONT></P> <P style="MARGIN-BOTTOM: 0cm" class=western><FONT face="Times New Roman, Times, serif">A composição físico-química e nutricional do solo faz deste um ambiente extremamente variado. Bactérias desse nicho possuem adaptações genéticas que viabilizam sua existência em situações limitantes. Já que o nitrogênio é um elemento essencial para a manutenção dos seres vivos, compondo moléculas como ácidos nucléicos, sua ausência é um fator que pode limitar o desenvolvimento dessas bactérias. Portanto, trabalhos que visem entender os mecanismos de reposta de <EM>A. amazonense</EM>- o qual ainda não possui genoma seqüenciado- ao estresse de nitrogênio são relevantes. Experimentos prévios de cDNA-RDA indicaram que o gene <EM>dnaK</EM>, típico de resposta ao choque térmico, e o gene <EM>dig</EM>, envolvido na formação de biofilme, são expressos em condições de deficiência de nitrogênio. No entanto, a exata regulação desses genes nessa condição de estresse ainda é desconhecida. Portanto o objetivo deste trabalho é identificar elementos cis-atuantes na região promotora dos genes <EM>dnaK</EM> e <EM>dig</EM> de <EM>A. amazonense</EM>. </FONT></P> <P style="MARGIN-BOTTOM: 0cm" class=western><FONT face="Times New Roman, Times, serif">Nossos resultados, a partir de PCR Genome Walker, técnica para caminhada cromossômica, revelaram uma região codificadora parcial de 1492pb com alta identidade ao gene <EM>dnaK</EM> de <EM>Magnetospirillum magneticum</EM> e uma região à montante da região codificadora com 117pb. Análises in silico indicam que a região à montante não apresenta sequencias promotoras dependentes de sigma 54 ou sítios de ligação a NtrC, elementos típicos de resposta à limitação de nitrogênio. Para o gene <EM>dig</EM>, a partir da mesma técnica, foi isolada uma região codificadora parcial de 700pb com alta identidade ao gene dig de <EM>Desulfuromonas acetoxidans</EM>.</FONT></P> <P style="MARGIN-BOTTOM: 0cm" class=western><FONT face="Times New Roman, Times, serif">Pretende-se, através da técnica Real Time-PCR, avaliar outras condições que poderiam regular a transcrição desses genes como privação de carbono e estresse térmico. Outra perspectiva é analisar a atividade dos promotores <EM>in</EM> <EM>vivo</EM> em estresse por privação nutricional, utilizando o gene repórter <EM>eyfp</EM> que codifica para uma proteína fluorescente.</FONT></P> <P style="MARGIN-BOTTOM: 0cm" class=western><FONT face="Times New Roman, Times, serif"><BR></FONT></P> <P style="MARGIN-BOTTOM: 0cm" class=western><FONT face="Times New Roman, Times, serif">FAPERGS, CNPq &amp; CAPES</FONT></P></font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;agricultura sustentável, Azospirillum amazonense, diguanilato ciclase/fosfodiesterase, DnaK, privação de nitrogênio</td></tr></table></tr></td></table></body></html>