25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

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Leona Melo (UFRJ); Patrícia Gitahy (EMBRAPA/CNPAB); Paulo Boa Sort (UFRRJ); José Baldani (EMBRAPA/CNPAB); Jordano Avelar (EMBRAPA/CNPAB)

Bactérias endofíticas são aquelas que habitam o interior de tecidos vegetais sem causar dano aparente aos mesmos. Com o objetivo de verificar a natureza endofítica de Bacillus thuringiensis (Bt) e sua persistência no interior de tecidos de cana-de-açúcar em nível de campo, plântulas micropropagadas da variedade SP701143 foram inoculadas com Bt subsp. kurstaki S76. Este microrganismo apresenta atividade entomopatogênica contra larvas da broca da cana-de-açúcar Diatraea saccharalis. As plantas foram aclimatadas, transferidas para vasos e transplantadas para o campo experimental da Embrapa Agrobiologia, Seropédica-RJ, onde permanecem há aproximadamente sete anos. O reisolamento das bactérias inoculadas do interior dos tecidos vegetais foi realizado através da extração do líquido apoplástico coletado das plantas da 4^a soca. As amostras foram pasteurizadas, plaqueadas em meio de cultura LB e as colônias obtidas, analisadas morfologicamente e por microscopia ótica. Aproximadamente 30 colônias bacterianas morfologicamente diferentes foram isoladas sendo que 12 destas bactérias apresentaram características de células de Bacillus após a análise por microscopia ótica de contraste de fase. Seis dessas colônias eram provenientes de plantas inoculadas e as outras seis de plantas não inoculadas. Foi realizada a extração de DNA das 12 colônias após o cultivo em meio líquido LB seguido de amplificação por reação de PCR com iniciadores específicos para o gênero Bacillus. Foram observados produto de amplificação do tamanho esperado (aproximadamente 995 pares de base) para todos os isolados inclusive para a estirpe controle S76. A Eletroforese em Gel com Gradiente Desnaturante (DGGE) revelou a presença de várias bandas distintas tanto de colônias originárias de plantas inoculadas como de plantas controles. A presença de bandas em posições diferentes, sugere a presença de diversas espécies do gênero Bacillus, inclusive da bactéria inoculada S76, colonizando endofiticamente o apoplasto de plantas de cana-de-açúcar cultivadas em condições de campo. Estudos adicionais deverão contribuir para um melhor entendimento sobre a interação entre B. thuringiensis e plantas de cana-de-açúcar, e avaliar novas formas de controle biológico considerando a possível capacidade endofítica de Bt em controlar insetos que se alimentam dos tecidos internos de plantas de cana.਀