ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:1540-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Genética e Biologia Molecular ( Divisão N )</b><p align=justify><strong> CARACTERIZAÇÃO DOS GENES <SPAN STYLE="FONT-STYLE: ITALIC;">RPOH </SPAN>E <SPAN STYLE="FONT-STYLE: ITALIC;">RELA </SPAN>EM <SPAN STYLE="FONT-STYLE: ITALIC;">AZOSPIRILLUM AMAZONENSE</SPAN> </strong></p><p align=justify><b><u>Maicon Ricardo Stange Machado </u></b> (<i>UFRGS</i>); <b>Fernando Hayashi Sant'anna </b> (<i>UFRGS</i>); <b>Debora Broch Trentini </b> (<i>UFRGS</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2> <span style="font-family: Symbol;"><span style="font-family: Symbol;">A batéria <span style="font-style: italic;">Azopirillum amazonense </span>promove o crescimento de plantas com importância econômica através da fixação de N<sub>2</sub> e produção de fitormônios. Sendo assim, esta bactéria apresenta potencial para reduzir o uso de fertilizantes nitrogenados na agricultura, os quais podem tranformar-se em perigosos poluentes. A fixação é energeticamente onerosa, sendo controlada em diferentes níveis pela bactéria. Estudos prévios em nosso laboratório (cDNA-RDA) indicaram que os genes <span style="font-style: italic;">rpoH </span>e <span style="font-style: italic;">relA </span>são transcritos em condições limitantes de nitrogênio. Em <span style="font-style: italic;">Escherichia coli, rpoH </span>codifica a subunidade sigma 32, um fator para genes relacionados ao choque térmico, enquanto <span style="font-style: italic;">relA </span>envolve-se na síntese de ppGpp, um mediador da resposta estringente, fundamental em momentos de estresse nutritivo.<br>No presente trabalho foram isolados as regiões codificadoras e reguladoras de <span style="font-style: italic;">rpoH e relA </span>pelo método GenomeWalker, baseado na amplificação de sequências alvo a partir de bibliotecas genômicas ligadas a adaptadores. Após efetivou-se a clonagem, sequenciamento e análise dos amplicons com ferramentas de bioinformática. Foram ainda utilizadas matrizes de peso para a busca de potenciais sequências promotoras.<br>Foi isolado o <span style="font-style: italic;">rpoH </span>completo e 31pb da região 5' adjacente, não permitindo a identificação de sequências promotoras. Sua região à jusante possui um homólogo a genes que codificam proteínas contendo repetições de pentapeptídeos, atribuídas à resistência para antibióticos com ação na DNA girase. Foram isolados 271pb e 1337pb da região reguladora e codificante, respectivamente, do <span style="font-style: italic;">relA. </span>Sua porção 3' está sendo isolada. A análise da região à montante desse gene mostrou um provável promotor dependente do fator transcricional sigma 54, ligado a promotores regulados em função da presença de nitrogênio.<br>Portanto, a presença de um provável promotor sigma 54 na região à montante de <span style="font-style: italic;">relA </span>corrobora com o isolamento desse gene em condições de privação de nitrogênio. Além disso, o fato desse gene estar associado à resposta à falta de aminoácidos em outros organismos contribui para o entendimento de seu papel fisiológico na bactéria <span style="font-style: italic;">A. amazonense. </span>Já para o <span style="font-style: italic;">rpoH, </span>alguns estudos o sugerem a muitas condições de estresse na célula, mas ainda são necessários mais esforços para vinculá-lo ao estresse por privação de nitrogênio. Futuramente, serão avaliadas, através de qRT-PCR, as condições que propiciam a expressão desses genes em <span style="font-style: italic;">A. amazonense.<br></span>Financiamento: PIBIC-CNPq<br></span></span> </font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Azospirillum, Fixação do Nitrogênio, Promoção do crescimento de plantas, relA, rpoH</td></tr></table></tr></td></table></body></html>