25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

ResumoID:1508-2

Área: Microbiologia Clinica ( Divisão A )

MÚLTIPLOS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA EM PSEUDOMONAS AERUGINOSA E SELEÇÃO DE CLONES ENDÊMICOS DISSEMINADOS&NBSP;EM&NBSP;SÃO&NBSP;PAULO, BRASIL&NBSP;

Patrícia R. Neves (FCF/USP); Carlos E. Levy (UNICAMP); Elsa M. Mamizuka (FCF/USP); Nilton Lincopan (FCF/USP)

Resumo

Isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa multirresistentes (PAMR) estão associados a elevadas taxas de mortalidade. Embora carbapenênicos e aminoglicosídeos sejam a terapia de escolha, altos níveis de resistência a ambas classes de antibióticos têm sido relatados. O objetivo deste trabalho foi investigar os mecanismos de resistência associados à porinas, bombas de efluxo, produção de metalo-b-lactamases (MbLs) e metilases, e determinar a sua relação clonal. No presente estudo foram incluídos 76 isolados clínicos de PAMR. Genes codificadores de porina oprD, MbLs (bla_VIM, bla_IMP, bla_SPM) e 16S rRNA metilases (rmtA, rmtB, rmtC, rmtD e armA) foram analizados por PCR. Perfis de resistência e a CIM na presença/ausência de inibidores de MbLs e bombas de efluxo foram determinados por Kirby-Bauer e métodos de diluição em ágar, respectivamente. A análise das proteínas foi realizada por SDS-PAGE e a diversidade clonal foi investigada por ERIC-PCR. Os isolados exibiram um alto nível de resistência ao IPM (100%, CIM₅₀ = 128 μg/ml), meropenem (86%), ciprofloxacina (82%), ceftazidima (74%) e amicacina (71%). Genes codificadores de MbLs foram encontrados em 80% dos isolados (68% bla_SPM e 12% bla_VIM). Todos os isolados carregando o gene bla_SPM apresentaram redução nos valores da CIM do IPM na presença de EDTA (CIM₅₀ de 512 para 16 μg/ml), enquanto os isolados carregando o gene bla_VIM apresentaram um baixo decréscimo na CIM do IPM (CIM₅₀ = 16 μg/ml), que não apresentou redução na presença de EDTA. O SDS-PAGE revelou a ausência de porinas (45 - 47 kDa) em amostras produtoras de MbL (68%) e não produtoras de MbL (81%). Na pesquisa de bombas de efluxo, 51/76 isolados (67%) apresentaram um decréscimo > 4 diluições na CIM de levofloxacina na presença do inibidor PAbN. Com relação às metilases, o gene rmtD, responsável pela modificação da subunidade ribossomal 30S foi encontrado em 70% dos isolados amicacina resistentes. Entretanto, a produção de RmtD foi prevalente entre isolados produtores de SPM-1 (65%), que perfizeram um total de 12 dentre 24 clones diferentes identificados por ERIC-PCR. A convergência de múltiplos mecanismos de resistência em P. aeruginosa parece ser um evento favorável para a seleção de clones endêmicos multirresistentes disseminados na região Sudeste do Brasil.

Palavras-chave: Resistência ao imipenem, Pseudomonas aeruginosa, Metalo-beta-lactamase, 16S rRNA metilases, Porinas e bombas de efluxo

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