ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:1416-2</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Genética e Biologia Molecular ( Divisão N )</b><p align=justify><strong> CARACTERIZAÇÃO DE FOSFOLIPASES DE <SPAN STYLE="FONT-STYLE: ITALIC;">PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS </SPAN>NA INTERAÇÃO COM MACRÓFAGOS ALVEOLARES </strong></p><p align=justify><b><u>Deyze Alencar Soares </u></b> (<i>UFG</i>); <b>Rosângela Vieira Andrade </b> (<i>UCB</i>); <b>Maria Sueli Soares Felipe </b> (<i>UNB</i>); <b>Silvana Petrofeza da Silva </b> (<i>UFG</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2><div style="text-align: justify;"><span style="font-style: italic;">Paracoccidioides brasiliensis</span> possui vários fatores de virulência que participam do processo de invasão do hospedeiro pelo fungo.Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi verificar a expressão dos genes correspondentes às fosfolipases de <span style="font-style: italic;">P.brasiliensis</span> na interação com macrófagos alveolares.Para isto, foram selecionadas sequências gênicas de fosfolipases B(PLB),C(PLC) e D(PLD) no transcriptomas de <span style="font-style: italic;">P.brasiliensis</span> (Pb01).Estas foram traduzidas para sequências de aminoácidos correspondentes através do programa TRANSLATE e comparadas com sequências de proteínas correspondentes a fatores de virulência de fungos patogênicos humanos disponíveis em banco de dados (Genebank,EMBL) utilizando como ferramentas o programa BLASTP.A sequência PBDEX-Y1-034t-A03 apresentou maior homologia com a PLB do fungo <span style="font-style: italic;">Ajellomyces capsulatus</span>.Dos 639 aminoácidos analisados,76% apresentaram-se idênticos e 88% conservados.A comparação entre essa sequência parcial da PLB de <span style="font-style: italic;">P.brasiliensis</span> e a de <span style="font-style: italic;">Coccidioides immitis </span>demonstrou elevado grau de conservação na sequência (79% similaridade,67% identidade) o mesmo foi observado para PLB de <span style="font-style: italic;">Candida albicans</span> (61% similaridade,42% identidade).Já a sequência PBDEX-Y1-043t-B05 apresentou maior homologia com a PLC do fungo <span style="font-style: italic;">A.capsulatus</span>.Dos aminoácidos analisados (68% identidade,79% similaridade).A comparação entre essa sequência parcial de PLC de <span style="font-style: italic;">P.brasiliensis </span>e de <span style="font-style: italic;">C.immitis</span> demonstrou elevado grau de conservação na sequência (77% similaridade,65% identidade) o mesmo foi observado para PLC de <span style="font-style: italic;">C.albicans</span> (53% similaridade,35% identidade).A outra sequência obtida PBDEX-Y1-047t-B05 apresentou maior homologia com a PLD do fungo <span style="font-style: italic;">A. capsulatus</span>.Dos aminoácidos analisados ( 71% identidade,77% similaridade).A comparação entre essa sequência&nbsp; e a de <span style="font-style: italic;">C.immitis</span> demonstrou elevado grau de conservação na sequência (76% similaridade,67% identidade) o mesmo foi observado para PLD de <span style="font-style: italic;">Cryptococcus neoformans </span>(54% similaridade,38% identidade).A análise dos níveis de transcritos dos genes que codificam para fosfolipases foi realizada usando RT-PCR em tempo real pelo método de comparação do CT ( Crossing Threshold), utilizando o gene constitutivo que codifica para alfa tubulina de <span style="font-style: italic;">P.brasiliensis </span>para normalização.Foi observado que a <span style="font-style: italic;">plb1</span> apresentou maior acúmulo de 0,18 vezes em relação à outros genes de fosfolipases.Enquanto que a <span style="font-style: italic;">plc </span>e <span style="font-style: italic;">pld </span>apresentaram 0,06 e 0,11 vezes,respectivamente.A caracterização das fosfolipases pode ajudar no entendimento do mecanismo da ação dessas enzimas na interação fungo/hospedeiro. </div></font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Fosfolipases, Macrófagos alveolares, Paracoccidioides brasiliensis</td></tr></table></tr></td></table></body></html>