ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:1361-2</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Microbiologia Geral e Meio Ambiente ( Divisão L )</b><p align=justify><strong>ATIVIDADE LIPOLÍTICA EM BIBLIOTECAS METANOGÊNICAS CONSTRUÍDAS A PARTIR DE MICROBIOTA DE RESERVATÓRIO DE PETRÓLEO BIODEGRADADO</strong></p><p align=justify><b><u>Suzan Pantaroto de Vasconcellos </u></b> (<i>CPQBA, UNICAMP</i>); <b>Bruna Martins Dellagnezze </b> (<i>CPQBA, UNICAMP</i>); <b>Cynthia Canedo da Silva </b> (<i>CPQBA, UNICAMP</i>); <b>Eugenio Vaz dos Santos Neto </b> (<i>CENPES</i>); <b>Valeria Maia de Oliveira </b> (<i>CPQBA, UNICAMP</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2><P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 10pt; TEXT-INDENT: 35.4pt; LINE-HEIGHT: 150%; TEXT-ALIGN: justify; mso-layout-grid-align: none"><SPAN style="FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'">Apenas 2% dos microrganismos conhecidos e cultivados foram avaliados quanto a seu potencial biocatalítico. Neste sentido, a exploração de ambientes extremos, tais como reservatórios de petróleo, associada às técnicas de investigação metagenômica das comunidades microbianas pode gerar imensurável fonte de novos biocatalistas. Partindo de amostras de petróleo biodegradado (GMR), coletadas na Bacia Potiguar, foram realizados enriquecimentos aeróbios (30 d, 30<SUP>o</SUP>C, 90 rpm) e anaeróbios (90 d, 55<SUP>o</SUP>C, 90 rpm) da microbiota potencialmente biodegradadora de hidrocarbonetos, utilizando-se folhelhos como suportes físicos ao crescimento microbiano e hexadecano, ou óleo não biodegradado, como fontes de carbono e energia. Foram realizadas análises turbidimétricas para a quantificação da redução de sulfato pela microbiota anaeróbia, observando-se índices de 69%. A partir dos enriquecimentos aeróbios e anaeróbios, f<SPAN style="mso-bidi-font-weight: bold; mso-bidi-font-style: italic">oi possível a extração de DNA de alto peso molecular e a construção de uma biblioteca metagenômica </SPAN>utilizando-se o kit de clonagem <I style="mso-bidi-font-style: normal">Cloning-Ready Copy Control pCC1FOS</I> (EPICENTRE<SUP>®</SUP>). Um total de 30.000 clones foi obtido a partir da clonagem de DNA misto, proveniente da mistura entre os enriquecimentos aeróbios e anaeróbios. Ensaios para a determinação da atividade lipolítica de 5.000 clones, selecionados aleatoriamente, foram realizados em placas de ágar tributirina, utilizando-se a abordagem de triagens de alto desempenho por cultivo (HTC). Foram detectados 28 hits positivos, os quais se encontram em avaliação quanto à quantificação da atividade lipolítica através do<SPAN style="mso-bidi-font-weight: bold; mso-bidi-font-style: italic"> uso de sondas fluorogênicas. </SPAN>A diversidade da microbiota aeróbia e anaeróbia recuperada foi investigada através da construção de uma biblioteca de genes RNAr 16S utilizando-se <I style="mso-bidi-font-style: normal">primers</I> genéricos para o Dominio Bacteria. A análise de 196 clones por metodologia de ARDRA revelou 86 ribotipos distintos. O seqüenciamento e análise filogenética revelou a predominância de bactérias dos gêneros <I style="mso-bidi-font-style: normal">Petrobacter </I>sp. e <I style="mso-bidi-font-style: normal">Flexistipes </I>sp., nos enriquecimentos aeróbios e anaeróbios, respectivamente. Este estudo constitui o primeiro relato da construção e prospecção biocatalítica de bibliotecas metagenômicas a partir de reservatórios de petróleo brasileiros, revelando o potencial dos clones obtidos para futura aplicação biotecnológica.</SPAN></P></font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;lipase, petróleo, metagenoma, prospecção</td></tr></table></tr></td></table></body></html>