CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS CLÍNICOS DE CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS PROVENIENTE DE PACIENTES SUBMETIDOS A TRANSPLANTE RENAL.

Alyne M.s. Barbosa Barbosa (UNIFESP); Camila G. Barbosa Barbosa (UNIFESP); Renata C. Pascon Pascon (UNIFESP); Marcelo A. Vallim Vallim (UNIFESP)

O patógeno humano Cryptococcus neoformans é uma levedura encapsulada, que se reproduz por brotamento, e acomete pacientes imunocomprometidos, em especial os pacientes com AIDS, pacientes submetidos a transplante e pacientes submetidos a quimiterapia, causando a meningite fúngica, que se não tratada pode levar a morte. A criptococose apresenta um índice alto de mortalidade entre os pacientes submetidos a transplante renal. A capacidade de crescer a 37ºC, presença de cápsula e produção de melanina são definidos com fatores de virulência. Este fungo tem três variedades, 5 sorotipos e 8 genótipos: C. neoformans var. grubii (sorotipo A e genótipo VNI e VNII), C. neoformans var. neoformans (sorotipo D e  genótipos VNI e VNII) e C. neoformans var. gattii (sorotipo B e C e genótipos VGI, VGII, VGII e VGIV) e a forma híbrida diplóide sorotipo AD (genótipo VNII). Possui um sistema de "mating types", envolvendo dois tipos sexuais: MATα e MATa, sendo o MATα e o sorotipo A o mais virulento e com maior prevalência em isolados clínicos e ambientais. Este trabalho tem como objetivo a caracterização molecular de 36 isolados clínicos de C. neoformans provenientes de pacientes submetidos a transplante renal do Hospital de São Paulo (HSP) e Hospital do Rim e Hipertensão (HRH) durante o período de janeiro de 1995 a janeiro de 2007. Foram determinados o tipo sexual e o sorotipo de 36 isolados clínicos utilizando a técnica de PCR, dentre os quais prevaleceu o tipo sexual α e o sorotipo A. Quanto a genotipagem, esta foi feito empregando duas ferramentas 1) PCR seguido da disgetão com enzima de restrição e 2) sequenciamento do locus para o gene da fosfolipase B (PLB-1) alcançando o seguinte resultado: 34 são VNI/VNII, 3 são VGII. Além disso, será traçado um perfil molecular de cada um destes isolados pelo método de RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) o que possibilitará a melhor caracterização da diversidade genética desta população de isolados.