ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:1322-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Microbiologia Geral ( Divisão H )</b><p align=justify><strong>ANÁLISE DO GENE MUTADO DE <EM>PSEUDOMONAS</EM> SP (LFM693) PARA ESTUDO DO METABOLISMO DE PROPIONATO NA INCORPORAÇÃO DE MONÔMEROS DE CADEIA ÍMPAR EM PHAMCL.</strong></p><p align=justify><b><u>Nathália Fernandes Gonçalves Machado </u></b> (<i>USP</i>); <b>Estela de Almeida Brandi </b> (<i>USP</i>); <b>Rafael Costa Santos Rocha </b> (<i>USP</i>); <b>José Gregório Cabrera Gomez </b> (<i>USP</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2>Polihidroxialcanoatos (PHA) são poliésteres acumulados por diversas bactérias na forma de grânulos intracelulares. Existem 2 classes de PHA: PHAscl (<EM>short chain lenght</EM>) e PHAmcl&nbsp;(<EM>medium chain lenght</EM>). Este último contém monômeros de cadeia média (6-16&nbsp;átomos de carbono), são encontrados em <EM>Pseudomonas</EM> sp e apresentam propriedades elastoméricas. A linhagem&nbsp;LFM693, de&nbsp;<EM>Pseudomonas</EM> sp, fez parte de um programa de melhoramento genético com o objetivo de estudar o metabolismo de propionato na formação de PHAmcl. Obtida por transposon mini-Tn5, LFM693 destacou-se por ser capaz de elevar a eficiência na oxidação de ácido propiônico&nbsp;durante a fase de acúmulo, aumentando, assim, a incorporação de monômeros de cadeia&nbsp;ímpar em PHAmcl. A incorporação destes monômeros possibilita alterar as propriedadadees elastoméricas do biopolímero contribuindo para ampliar seu espectro de utilização. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o gene interrompido, bem como o número de inserções do transposon mini-Tn5 no genoma de <EM>Pseudomonas</EM>&nbsp;sp. Para tanto, a cepa mutante foi sequenciada empregando os <EM>primers</EM> Ext12f, M13f e M13r e, posteriormente, estas sequencias foram analisadas empregando o <EM>software</EM> TBLASTX e comparadas com outras linhagens de <EM>Pseudomonas</EM> sp. Em outra análise, foi empregada a metodologia de <EM>Southern Blot</EM> para analisar em quantos locais distintos o transposon havia se inserido no genoma. As análises das sequencias obtidas permitiram identificar que o transposon foi inserido em uma região que codifica para o gene 2-metilisocitrato liase (<EM>prpB</EM>). Este gene está relacionado ao ciclo do 2-metilcitrato, o qual está descrito como uma das&nbsp;vias para oxidação de ácido propiônico em procariotos para a incorporação de monômeros de cadeia ímpar. A análise empregando <EM>Southern Blot</EM> possibilitou identificar apenas um local de inserção no genoma de <EM>Pseudomonas</EM> sp, corroborando com a característica fenotípica observada e&nbsp;com a análise do sequenciamento. Os dados apresentados no presente trabalho contribuem para o estudo do metabolismo de propionato em procariotos. &nbsp;&nbsp;</font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Metabolismo de propionato, Polihidroxialcanoatos, Pseudomonas</td></tr></table></tr></td></table></body></html>