DIVERSIDADE FENOTÍPICA DE ESTIRPES ISOLADAS DE NÓDULOS DE SESBANIA VIRGATA

Wesley de Melo Rangel (UFLA); Paula Marcela Duque Jaramillo (UFLA); Amanda Azarias Guimarães (UFLA); Jacqueline Savana Silva (UFLA); Ligiane Aparecida Florentino (UFLA); Fatima Maria de Souza Moreira (UFLA)

As estirpes isoladas de nódulos de Sesbania virgata apresentam características culturais, efetividade simbiótica e perfis de proteínas totais com alta similaridade à estirpe tipo de Azorhizobium doebereinerae, BR5401^T. O objetivo deste trabalho foi avaliar a tolerância a diferentes temperaturas e antibióticos de 11 estirpes isoladas de nódulos de S. virgata e das espécies tipo de A. caulinodans (ORS 571^T) e A. doebereinerae (BR 5401^T). Esses testes foram realizados em placas contendo o meio Lactato (LO). As temperaturas estudadas foram: 15, 27, 35 e 40ºC e 15 tipos de antibióticos em discos nas seguintes concentrações (μgL^-1): Amoxicilina-AMO (10); Ampicilina-AMP (10); Estreptomicina-EST (10); Gentamicina-GEN (10); Azitromicina-AZI (15); Claritromicina-CLA (15); Eritromicina-ERI (15); Ácido Nalidíxico-NAL (30); Cloranfenicol-CLO (30); Kanamicina-KAN (30); Rifamicina-RFM (30); Tetraciclina-TET (30); Vancomicina-VAN (30); Sulfonamidas-SUL (300). Foi testado também Bacitracina-BC (10 U.I.). No teste de temperatura, as estirpes foram cultivadas em meio LO líquido por 72 h. Um mL dessas culturas foram centrifugadas a 10.000rpm, a 4ºC por 10min, ressuspensas em 1mL de NaCl (0,85%) e novamente centrifugadas. Esse processo foi repetido por 3 vezes. Após, alíquotas de 0,1mL dessas suspensões foram espalhadas nas placas e incubadas por 72h. Utilizaram-se 3 repetições e foi avaliada a presença ou ausência de crescimento. Para o teste de tolerância aos antibióticos, foi utilizado o método de difusão dos discos impregnados. As estirpes foram cultivadas em placas de Ágar Nutriente. O inóculo foi diluído em solução salina NaCl (0,85%) até obter uma turbidez equivalente ao tubo 0,5 da escala Mac Farland. Essas suspensões foram transferidas para placas contendo meio LO com o auxílio de swabs de algodão. Posteriormente, foram inseridos 4 discos de antibióticos por placa. Estas foram incubadas a 27ºC por 72h. O experimento foi desenvolvido em duplicata e avaliou-se a presença ou ausência de halo de inibição. Foi observado crescimento para todas as estirpes nas temperaturas de 15, 27 e 35ºC. A 40ºC, apenas 5 estirpes isoladas de S. virgata e ORS 571^T apresentaram crescimento. Todos os isolados foram sensíveis aos antibióticos RFM, NAL, GEN, TET, KAN, SUL e resistentes a VAN, AMO, BC e AMP. Em relação aos outros antibióticos as estirpes apresentaram comportamento variável.