25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

ResumoID:1242-2

Área: Microbiologia Veterinária ( Divisão G )

DETECÇÃO DE MYCOPLASMA DO GRUPO MYCOIDES PELA PCR EM REBANHO CAPRINO LEITEIRO DE MINAS GERAIS, BRASIL.

Juliana Ferreira de Almeida (UFF); Maria Lúcia Barreto (UFF); Elmiro Rosendo do Nascimento (UFF); Karine Meireles de Castro (UFF); Eunice Maria Rodrigues Alberto (UFF); Sandra Batista dos Santos (UFF)

Resumo

A Micoplasmose caprina pode representar um fator limitante para a caprinocultura brasileira em detrimento da queda ou parada na produção leiteira e elevada morte de crias. Espécies patogênicas de micoplasmas podem desencadear sinais clínicos como: artrite ou poliartrite, conjuntivite, linfadenite, peritonite, pericardite, mastite, septicemia, pneumonia e febre. O diagnóstico imediato é fundamental para conter as perdas econômicas e adotar medidas de controle, o que pode ser realizado pela identificação genômica do agente etiológico, bastante difundida pela utilização da PCR, por ser rápida, sensível e específica na detecção de espécies variadas de micoplasmas, inclusive as que apresentam grande similaridade genética. Este estudo objetivou a identificação do agente causal de um surto de poliartrite e pneumonia em rebanho caprino leiteiro de Minas Gerais, Brasil. Foram remetidos 16 espécimes clínicos, em glicerina (1:1) e refrigerados, ao Laboratório de Epidemiologia Molecular da Faculdade de Veterinária – UFF, sendo quatro amostras de fragmentos de pulmão, seis de líquido articular e seis de suabes de orofaringe. Os espécimes clínicos, controle positivo (cepa padrão Mycoplasma mycoides “Large Colony”) e controle negativo (água para PCR) foram processados pelo método fenol/clorofórmio para a extração do DNA. A PCR consistiu de: 96°C/3min.; 33 ciclos com desnaturação a 96°C/30seg., pareamento a 60°C/30seg. e extensão a 72°C/1min.; 72°C/5 min. e 4°C/5 min. Cada tubo de reação continha 59uL de água para PCR, 10uL de tampão PCR 10X, 5uL de MgCl₂, 5uL de dNTPmix (0,25mM de cada), 2uL de cada primer (5`-GAA ACG AAA GAT AAT ACC GCA TGT AG-3`e 5`-CCA CTT GTG CGG GTC CCC GTC-3`, 15uL de DNA extraído em tampão Tris-EDTA e 2uL de TaqPolimerase (1U/uL). Foram obtidos amplicons de 785pb no controle positivo, em 33,3% (2/6) dos líquidos articulares e em 50% (2/4)% dos fragmentos de pulmão. A detecção do agente, feita diretamente de espécimes clínicos, permitiu maior rapidez no diagnóstico dessa doença, fundamental para a adoção de medidas de controle e profilaxia. Agradecimentos ao CNPq e à FAPERJ pelo apoio financeiro.

Palavras-chave: artrite, caprino, leite, micoplasma, PCR

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