ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:1233-2</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Micologia Médica ( Divisão B )</b><p align=justify><strong><P ALIGN=CENTER>IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR DE LEVEDURAS DO GÊNERO <EM>CANDIDA</EM></P></strong></p><p align=justify><b>Elaine Patrícia Tavares do Espírito Santo </b> (<i>IEC</i>); <b>Karla Valéria Batista Lima </b> (<i>IEC</i>); <b>Silvia Helena Marques da Silva </b> (<i>IEC</i>); <b><u>Maurimelia Mesquita da Costa </u></b> (<i>IEC</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2><P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><B style="mso-bidi-font-weight: normal">Introdução:</B> Leveduras do gênero <I>Candida </I>fazem parte da microbiota humana normal e podem estar envolvidas na etiologia de infecções graves. Testes micológicos apresentam limitações relacionadas ao número de espécies passíveis de identificação. </P> <P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><B style="mso-bidi-font-weight: normal">Objetivo: </B>Avaliar a aplicabilidade da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para a identificação de espécies de <I style="mso-bidi-font-style: normal">Candida</I> sp. </P> <P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><B style="mso-bidi-font-weight: normal">Material e Métodos: </B>Foram avaliados 178 cultivos de leveduras obtidas de amostras clínicas diversas, cultivadas em ágar Sabouraud e Mycosel e identificadas em sistema automatizado ID <?xml:namespace prefix = st1 ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:smarttags" /><st1:metricconverter w:st="on" ProductID="32C">32C</st1:metricconverter> (<I style="mso-bidi-font-style: normal">bioMérieux</I>). O DNA fúngico foi<SPAN style="LETTER-SPACING: -0.2pt"> extraído utilizando fenol-clorofórmio-álcool isoamílico. Para PCR foram utilizados</SPAN> <I style="mso-bidi-font-style: normal">primers </I>específicos para fungos ITS1 e ITS2, além dos <I style="mso-bidi-font-style: normal">primers</I> específicos para <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. albicans</I> CA3 e CA4 que amplificam uma porção da região do ITS2 de <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. albicans</I>. </P> <P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><B style="mso-bidi-font-weight: normal">Resultados e Discussão: </B>Das 178 amostras, 159 pertenciam ao gênero <I style="mso-bidi-font-style: normal">Candida </I>e <st1:metricconverter w:st="on" ProductID="19 a">19 a</st1:metricconverter> outros gêneros. Os produtos de PCR foram analisados em gel de poliacrilamida a 6% apresentando os seguintes fragmentos: <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. albicans</I> com os <I style="mso-bidi-font-style: normal">primers</I> ITS1 e ITS2 apresentou o tamanho de 218 pb, com os <I style="mso-bidi-font-style: normal">primers</I> CA3 e CA4 apresentou o tamanho de 110 pb, as demais espécies com os <I style="mso-bidi-font-style: normal">primers </I>ITS1 e ITS2 apresentaram fragmentos de: <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. parapsilosis</I> (225 pb e 229 pb), <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. tropicalis </I>(218 pb), <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. haemulonii</I> (145 pb e 150 pb), <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. sake</I> (150 pb e 229 pb),<SPAN style="mso-spacerun: yes">&nbsp; </SPAN><I style="mso-bidi-font-style: normal">C. glabrata</I> (482 pb), <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. guilliermondii</I> (248 pb), <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. curvata</I> (200 pb), <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. melibiosica</I> (140 pb), <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. dubliniensis</I> (218 pb), <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. krusei</I> (182 pb), <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. intermedia</I> (151 pb) e <I style="mso-bidi-font-style: normal">C. sphaerica</I> (280 pb). A PCR apresentou sensibilidade de 95,6% e especificidade de 100%. A comparação estatística com o ID <st1:metricconverter w:st="on" ProductID="32C">32C</st1:metricconverter> evidenciou elevada concordância entre as técnicas analisadas (Kappa = 0,8226, <I style="mso-bidi-font-style: normal">p</I> = 0,0001). </P> <P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><B style="mso-bidi-font-weight: normal">Conclusão: </B>A PCR apresentou resultados confiáveis para identificação de espécies de <I style="mso-bidi-font-style: normal">Candida.</I></P></font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Candida, Identificação Molecular, PCR</td></tr></table></tr></td></table></body></html>