25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

ResumoID:1228-1

Área: Imunologia Clínica e Diagnóstico ( Divisão F )

ESTUDO DA RESPOSTA IMUNE DE ANTICORPOS IGG, AVIDEZ E SUBCLASSES NA EVOLUÇÃO DA TUBERCULOSE PULMONAR

Alvina Clara Felix (FMUSP); Olavo Henrique Munhoz Leite (FMUSP); Rosilaine Arruda (HC); Antonio Walter Ferreira (IMTSP)

Resumo

A Tuberculose é uma doença infecto contagiosa causada pelo Bacilo de Koch. Em 2007 a OMS estimou que no mundo ocorreram 8,8 milhões de casos novos/ano, enquanto no Brasil foram estimados cerca de 110 mil casos novos/ano, com 6000 óbitos. O diagnóstico da doença é realizado através de critérios microbiológicos, radiológicos e epidemiológicos. Atualmente testes sorológicos estão sendo estudados para a realização do diagnóstico da doença. Objetivos: estudar a resposta imune de anticorpos IgG, avidez e subclasses de pacientes com tuberculose pulmonar ativa. Materiais e Métodos: a partir do antígeno de cepa clínica de Mycobacterium tuberculosis, foi realizada uma corrida eletroforética e transferência para membrana de nitrocelulose onde ocorreu a reação imunoenzimática, foram utilizados anticorpos monoclonais anti IgG marcado com peroxidase diluído 1/500; anti-IgG1 e anti-IgG3 marcados com biotina diluídos a 1/100 e utilizou-se estreptoavidina diluída 1/100 na reação de subclasses de IgG, todas as reação foram reveladas com solução de 4 cloro-alpha-naphtol. Para a reação de avidez de anticorpos IgG, na primeira lavagem após a incubação das amostras foi utilizado Uréia 8M durante 5 minutos. Resultados e Discussão: foram analisadas amostras de soros de 5 pacientes, colhidas no início e ao final do tratamento. A região de 30 kDa está relacionada com atividade metabólica da micobactéria, foi reconhecida em todas as amostras por anticorpos IgG, sendo que na 3ª amostra a intensidade foi mais forte. Houve aparecimento de bandas da região de 16 kDa apenas na 3ª amostra de soros de alguns pacientes, porém após a lavagem com uréia a intensidade da banda foi menor, essa região é expressa pelo M. tuberculosis.quando submetido a baixa tensão de oxigênio, estando associada a infecção latente. A região de 6 kDa é melhor reconhecida na 3ª amostra e esta região não é sensível a lavagem com uréia. Em relação às subclasses IgG1, a banda mais freqüente foi a da região de 38 kDa, que é considerada uma proteína específica do complexo M. tuberculosis; nas subclasses IgG3 não houve similaridade entre os testes realizados, sendo encontradas bandas da região de 30 kDa, 20 kDa e 6 kDa. Conclusão: o papel fisiológico e patológico da reatividade de anticorpos das bandas estudadas está sendo avaliado com um número maior de pacientes. Apoio financeiro: CNPq nº 135725/2008-9.

Palavras-chave: tuberculose pulmonar, western blotting, sorologia, avidez, subclasses IgG

਀�