25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

ResumoID:1221-1

Área: Ecologia Microbiana ( Divisão I )

ACOMPANHAMENTO DA DINÂMICA DA COMUNIDADE BACTERIANA DE UM BIORREATOR DURANTE ETAPAS DE ALTERNÂNCIA ENTRE ACEPTORES FINAIS DE ELÉTRONS DISPONÍVEIS: A TÉCNICA DE T-RFLP É ADEQUADA?

Cristina Kampus Mantovani (FEA/UNICAMP); Roberto Augusto Caffaro Filho (UFAL); Fabiana Fantinatti-garboggini (UNICAMP); Lucia Regina Durrant (FEA/UNICAMP)

Resumo

Biorreatores são ótimos ecossistemas para estudos de ecologia microbiana, pois neles as condições abióticas podem ser controladas. Reatores de lodo ativado caracterizam-se por um ambiente aeróbio (oxigênio como aceptor final de elétrons). A aeração intermitente é uma modificação nesse tipo de reator. A fase do ciclo sem introdução de oxigênio é denominada anóxica quando há presença de nitrato no reator, sendo este utilizado como aceptor de elétrons por bactérias desnitrificantes, na presença de matéria orgânica. Neste trabalho foi estudada a comunidade microbiana de um reator em bateladas seqüenciais tratando despejo sintético composto por fenol e nitrogênio amoniacal, com aeração intermitente. Após a alimentação, o reator era mantido somente sob agitação. No início dessa fase anóxica, havia altas concentrações de fenol, nitrogênio amoniacal e nitrito. No final da fase, parte do fenol havia sido degradado, o nitrito havia sido reduzido a nitrogênio gasoso e a concentração de nitrogênio amoniacal era igual à inicial. Então era iniciada a aeração (24h), aonde reduziam-se as concentrações de fenol e nitrogênio amoniacal, que era oxidado (nitrificação), aumentando assim a concentração de nitrito ao longo da fase aerada. Seguia-se uma etapa de decantação e nova alimentação. O trabalho teve como objetivo avaliar se a técnica T-RFLP é adequada para acompanhar a teórica dinâmica na comunidade bacteriana do reator durante a alternância de aceptores de elétrons e também ao longo de um período maior de operação. Foram coletadas amostras (Ciclo 1) do reator imediatamente antes (A) e depois (D) do período de aeração. Nova coleta idêntica foi realizada após dois meses de operação do sistema (Ciclo 2). O DNA total foi extraído e o gene rRNA 16S foi amplificado com primer marcado, universal para eubactéria. Os amplicons foram digeridos e separados em seqüenciador no modo de genotipagem. Para cada amostra (A1, D1, A2, D2) duas enzimas diferentes foram testadas. Os perfis obtidos foram pouco diversos, característicos de ecossistemas limitantes. Dentro de um mesmo ciclo (1 ou 2) todos os fragmentos presentes nas amostras A foram também observados em D. Isso indica que a T-RFLP é bastante robusta e reprodutível. Nas amostras D haviam sempre fragmentos não detectados em A, provavelmente devido a uma maior quantidade de DNA após a aeração, e não a um aumento na diversidade. Já quando foram comparados os resultados dos ciclos 1 e 2, verificou-se desaparecimento de alguns fragmentos e surgimento de outros. Portanto, a técnica T-RFLP se mostrou adequada para se verificar a dinâmica da comunidade bacteriana no reator biológico ao longo de um período maior de operação. Porém, a dinâmica da comunidade durante a alternância de aceptores de elétrons não foi observada. Provavelmente isso não ocorreu por inadequação da T-RFLP em si. Estima-se que se o RNA da comunidade fosse usado na análise ao invés do DNA, tal dinâmica seria detectada.

Palavras-chave: lodo ativado, nitrificação, rRNA 16S, T-RFLP, tratamento aeróbio

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