25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

IDENTIFICAÇÃO DE ESPÉCIES DO "COMPLEXO" MYCOBACTERIUM TERRAE ATRAVÉS DE METODOLOGIA DO PRA (PCR E ANÁLISE DE ENZIMAS POR RESTRIÇÃO)਀

Luciana Distasio de Carvalho (CRPHF/ENSP/Fiocruz); Bianca Porphírio da Costa (CRPHF/ENSP/Fiocruz); Paulo Cesar de Souza Caldas (CRPHF/ENSP/Fiocruz); Mariza Villas Boas da Silva (CRPHF/ENSP/Fiocruz); Angela Maria Werneck Barreto (CRPHF/ENSP/Fiocruz); Carlos Eduardo Dias Campos (CRPHF/ENSP/Fiocruz)

As micobactérias são encontradas no meio ambiente e podem causar doenças ao homem e em animais. A principal doença causada pelas micobactérias é a tuberculose, que acomete a humanidade há milênios, de natureza infecto-contagiosa, cujo agente etiológico é o M. tuberculosis. O gênero Mycobacterium apresenta aproximadamente uma centena de espécies descritas, parte destas são patogênicas estritas, potencialmente patogênicas, ou oportunistas. O "Complexo" M. terrae inclui as espécies Mycobacterium triviale, Mycobacterium nonchromogenicum e Mycobacterium terrae. Esse "Complexo" geralmente é considerado como não patogênico, por se tratar de um raro colonizador do epitélio humano. Contudo, seus membros ocasionalmente tem causado doença humana. A rápida e precisa identificação de micobactérias e importante para a correta aplicação do esquema quimioterápico e uma melhor caracterização da espécie para estudos taxonômicos e epidemiológicos.
Um total de 38 culturas da coleção do Laboratório do Centro de Referência Professor Hélio Fraga, identificadas anteriormente pela metodologia clássica (bioquímica e crescimento na presença de agentes inibidores) como "Complexo" M. terrae, foram agora identificadas a nível de espécie pela metodologia do PRA (PCR e análise por enzimas de restrição) onde é realizada uma PCR para amplificar um fragmento de 440 pb dentro da sequencia do gene hsp65, específico do gênero Mycobacterium e a posterior digestão do fragmento por duas enzimas de restrição (BstEII e Hae III). Do total de cepas estudadas, 33 (86,8%) eram espécimes de origem pulmonar, 4 (10,5%) não informadas e 1 (2,6%) de urina. Foram identificadas 22 (57,9%) amostras como M. terrae, 10 (26,3%) como M. nonchromogenicum e 6 (15,8%) como M. triviale. Dentre as amostras de sítios pulmonares, as mais isoladas foram M. terrae 21 (63,6%), seguidas por M. nonchromogenicum 6 (18,2%) e M. triviale 6 (18,2%). No presente estudo, a técnica do PRA confirmou a identificação anterior pela metodologia clássica e mostrou ser uma ferramenta importante para a caracterização a nível de espécie desse grupo de micobactérias, além de ter possibilitado o conhecimento das espécies circulantes do "Complexo" M. terrae em nosso meio.