25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

ResumoID:1115-1

Área: Fermentação e Biotecnologia ( Divisão J )

INFLUÊNCIA DE FONTES DE NITROGÊNIO NO CRESCIMENTO MICELIAL E PRODUÇÃO DE PROTEASES DE LENTINUS CITRINUS DPUA 1535 POR FERMENTAÇÃO SUBMERSA

Larissa de Souza Kirsch (UFAM); Valéria de Carvalho Santos-ebinuma (USP); Maria Francisca Simas Teixeira (UFAM)

Resumo

Embora diversas espécies de cogumelos tenham sido investigadas quanto as exigências fisiológicas para seu crescimento e produção de proteases há carência de estudos envolvendo a influência de nutrientes na produção dessas enzimas por L. citrinus. O objetivo deste trabalho foi verificar a influência de fontes de nitrogênio no crescimento e produção de proteases de L. citrinus por fermentação submersa. Culturas estoque foram obtidas em ágar batata dextrose+extrato de levedura 0,5% (p/v)-BDA, por 8 dias/25 ºC. Dessas culturas foram transferidos discos de micélio para BDA, mantendo os cultivos nas mesmas condições de crescimento da cultura estoque. Para produção de proteases, os meios de fermentação foram formulados (g/L): KH₂PO₄ (0,5), MgSO₄.7H₂O (0,5), glicose (20) e fontes de nitrogênio (NH₄)₂SO₄, NaNO₃, NH₄NO₃, peptona, gelatina, triptona, extrato de carne e extrato de malte (5,0). Em cada frasco Erlenmeyer contendo 30 mL de meio líquido, pH 6,5 foram inoculados 8 discos miceliais (Ø=8mm) e a fermentação foi conduzida a 150 rpm/28 ºC/5 dias. Ao término do processo fermentativo, o extrato bruto foi separado por filtração à vácuo, determinando-se a atividade de proteases com azocaseína 1% (p/v) e a biomassa foi desidratada a 40 ºC. Os resultados mostraram que dentre as fontes de nitrogênio testadas, extrato de carne proporcionou a maior produção de proteases (40,00 U/mL), seguida por extrato de malte (37,87 U/mL), triptona (28,67 U/mL), gelatina (28,33 U/mL), NaNO₃(24,44 U/mL) e peptona (26,56 U/mL). Todavia, quando se utilizou NH₄NO₃ e (NH₄)₂SO_4, a atividade das proteases foi inferior em relação as demais fontes (8,44 U/mL, 10,00 U/mL, respectivamente). Nestes meios, o pH final do extrato foi inferior a 4,0, o que pode explicar o reduzido valor na produção dessas enzimas, considerando que os demais extratos apresentaram valores de pH entre 5,0 e 6,0. Quanto ao crescimento, os maiores valores de biomassa foram obtidos nos meios contendo extrato de carne (6,77 mg/mL), gelatina (6,27 mg/mL), triptona (5,36 mg/mL), extrato de malte (4,99 mg/mL), peptona (3,72 mg/mL), NaNO₃(3,09 mg/mL), (NH₄)₂SO₄(2,51 mg/mL), enquanto que o menor foi obtido com NH₄NO₃ (2,19 mg/mL). Portanto, verificou-se que, nas condições experimentais, as fontes complexas de nitrogênio favoreceram tanto o crescimento de L. citrinus quanto a produção de proteases por fermentação submersa.

Palavras-chave: biomassa, fermentação submersa, Lentinus citrinus, proteases

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