ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:1061-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Microbiologia Veterinária ( Divisão G )</b><p align=justify><strong>DETECÇÃO DE CORYNEBACTERIUM PSEUDOTUBERCULOSIS EM AMOSTRAS CLÍNICAS DE ANIMAIS ASSINTOMÁTICOS UTILIZANDO A TÉCNICA DE PCR EM TEMPO REAL </strong></p><p align=justify><b><u>Daniel Henrique Bücker </u></b> (<i>UFMG</i>); <b>Dayana Ribeiro </b> (<i>UFMG</i>); <b>Luis Gustavo de Carvalho Pacheco </b> (<i>UFMG</i>); <b>Fernanda Alves Dorella </b> (<i>UFMG</i>); <b>Thiago Luiz de Paula Castro </b> (<i>UFMG</i>); <b>Núbia Seyffert </b> (<i>UFMG</i>); <b>Anderson Miyoshi </b> (<i>UFMG</i>); <b>Vasco Ariston de Carvalho Azevedo </b> (<i>UFMG</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2> A linfadenite caseosa é uma doença infecto-contagiosa crônica que acomete caprinos e ovinos, e tem grande impacto econômico na caprinovinocultura brasileira, causando condenação das carcaças dos animais, contaminação do leite e perda de lã nos ovinos. A doença é causada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis, uma actinobactéria pleomórfica pertencente ao grupo CMN. Devido à grande importância econômica desta doença e a alta incidência da mesma nos rebanhos brasileiros, torna-se imperativo o desenvolvimento de um método diagnóstico eficaz para a detecção do patógeno no hospedeiro ainda em fase subclínica, com o intuito de controlar a transmissão da doença. A técnica de PCR em tempo real é bastante promissora para essa finalidade, por sua rapidez e alta sensibilidade. Foram realizadas coletas de sangue total e soro de 87 caprinos e 290 ovinos em propriedades rurais nos arredores de Araçatuba-SP. Os animais em sua maioria não possuíam sinais clínicos da doença, porém são criados em propriedades onde há animais doentes. Como teste comparativo foi relizado o ELISA indireto, utilizado para levantamentos de soroprevalência da doença. Foi encontrada baixa soroprevalência entre os animais testados. O DNA foi extraído utilizando a técnica de fenol-clorofórmio após a lise utilizando micropartículas de sílica sob forte agitação no equipamento Pre-Cellys®. A reação de PCR em tempo real utiliza como alvo o gene da fosfolipase D (<span style="font-style: italic;">pld</span>), e como controle interno de amplificação,&nbsp; o gene codificador da subunidade ribossomal mictocondrial 12S de caprinos e ovinos (<span style="font-style: italic;">12SrRNA</span>). A técnica está sendo padronizada para a detecção do DNA do patógeno na fase subclínica da linfadenite caseosa, e testes de sensibilidade e especificidade serão realizados para a validação do teste frente aos demais testes disponíveis para a detecção da presença do patógeno no hospedeiro.<br>Apoio financeiro: FAPEMIG.<br> </font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Corynebacterium pseudotuberculosis, Diagnóstico molecular, Diafgnóstico subclínico, PCR em tempo real</td></tr></table></tr></td></table></body></html>