| Área: Micologia Médica ( Divisão B ) ANÁLISE DA EXPRESSÃO DE GENES RELACIONADOS COM ESTRESSE OXIDATIVO DO FUNGO PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS DURANTE UMA CINÉTICA DE INTERAÇÃO COM PNEUMÓCITOS HUMANOS Adriane Alves de Oliveira (UnB); Simoneide Souza Silva (UnB); Cláudia Macedo (USP); Geraldo Aleixo da Silva Passos (USP); Maria Sueli Soares Felipe (UnB)
ResumoParacoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da mais comum micose sistêmica da América Latina, a paracoccidioidomicose (PCM). Na forma de levedura, P. brasiliensis atua como um patógeno intracelular facultativo, sendo capaz de sobreviver e se replicar no interior de macrófagos e células epiteliais, tais como pneumócitos, como um provável mecanismo de evadir do sistema imune. Recentemente, nosso grupo utilizou a tecnologia de microarranjos de cDNA para analisar a resposta transcricional inicial de P. brasiliensis recuperado do interior de macrófagos peritoneais murinos. Este estudo revelou que em resposta ao ambiente do interior do macrófago, P. brasiliensis modula positivamente os genes Hsp60 e superóxido dismutase Cu/Zn (SOD3), ambos relacionados à detoxificação de espécies reativas de oxigênio. Para investigar a resposta do patógeno recuperado de células não-fagocíticas nós analisamos a interação entre o fungo e a linhagem de pneumócitos humanos A549 durante uma cinética de infecção através da tecnologia de microarranjos de cDNA. P. brasiliensis foi co-cultivado por 48, 72 e 96 h com os pneumócitos e estes últimos foram lisados com a subsequente liberação do fungo intacto para extração do RNA total. Foi realizada a validação por PCR em tempo real para avaliar a expressão dos seguintes genes: Hsp70, Hsp60, Hsp104, SOD3 e catalase P. Todos os cinco genes foram positivamente modulados ao longo da cinética, indicando que durante a infecção dos pneumócitos humanos, P. brasiliensis necessite se proteger de espécies reativas de oxigênio. Além disso, a expressão aumentada de proteínas de choque térmico (Hsps) na fase de levedura pode ser importante para que o fungo suporte o estresse térmico para infectar e colonizar o hospedeiro humano. Portanto, com base nesses resultados e em dados previamente descritos na literatura, sugerimos fortemente que P. brasiliensis module positivamente genes relacionados à detoxificação de espécies reativas de oxigênio para sobreviver ao ambiente hostil do interior de pneumócitos humanos. 㰀倀 挀氀愀猀猀㴀䴀猀漀一漀爀洀愀氀 猀琀礀氀攀㴀∀䴀䄀刀䜀䤀一㨀 椀渀 椀渀 瀀琀㬀 洀猀漀ⴀ氀愀礀漀甀琀ⴀ最爀椀搀ⴀ愀氀椀最渀㨀 渀漀渀攀∀㸀㰀匀倀䄀一 氀愀渀最㴀倀吀ⴀ䈀刀 猀琀礀氀攀㴀∀䘀伀一吀ⴀ匀䤀娀䔀㨀 ㈀瀀琀㬀 䰀䤀一䔀ⴀ䠀䔀䤀䜀䠀吀㨀 㔀─㬀 䘀伀一吀ⴀ䘀䄀䴀䤀䰀夀㨀 ✀吀椀洀攀猀 一攀眀 刀漀洀愀渀✀㬀 洀猀漀ⴀ昀愀爀攀愀猀琀ⴀ氀愀渀最甀愀最攀㨀 倀吀ⴀ䈀刀㬀 洀猀漀ⴀ戀椀搀椀ⴀ昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀 椀琀愀氀椀挀∀㸀䄀瀀漀椀漀 䘀椀渀愀渀挀攀椀爀漀㨀 㰀⼀匀倀䄀一㸀㰀匀倀䄀一 氀愀渀最㴀倀吀ⴀ䈀刀 猀琀礀氀攀㴀∀䘀伀一吀ⴀ䘀䄀䴀䤀䰀夀㨀 ✀吀椀洀攀猀 一攀眀 刀漀洀愀渀✀㬀 洀猀漀ⴀ昀愀爀攀愀猀琀ⴀ氀愀渀最甀愀最攀㨀 倀吀ⴀ䈀刀∀㸀䘀䄀倀ⴀ䐀䘀⼀䌀一倀焀 攀 䴀䌀吀⼀䌀一倀焀⸀㰀⼀匀倀䄀一㸀㰀匀倀䄀一 氀愀渀最㴀倀吀ⴀ䈀刀 猀琀礀氀攀㴀∀䘀伀一吀ⴀ䘀䄀䴀䤀䰀夀㨀 ✀吀椀洀攀猀 一攀眀 刀漀洀愀渀✀∀㸀㰀漀㨀瀀㸀㰀⼀漀㨀瀀㸀㰀⼀匀倀䄀一㸀㰀⼀倀㸀㰀⼀昀漀渀琀㸀㰀⼀瀀㸀㰀戀爀㸀㰀戀㸀倀愀氀愀瘀爀愀猀ⴀ挀栀愀瘀攀㨀 㰀⼀戀㸀☀渀戀猀瀀㬀倀愀爀愀挀漀挀挀椀搀椀漀椀搀攀猀 戀爀愀猀椀氀椀攀渀猀椀猀Ⰰ 椀渀琀攀爀愀漀 瀀愀琀最攀渀漀ⴀ栀漀猀瀀攀搀攀椀爀漀Ⰰ 攀猀琀爀攀猀猀攀 漀砀椀搀愀琀椀瘀漀㰀⼀琀搀㸀㰀⼀琀爀㸀㰀⼀琀愀戀氀攀㸀㰀⼀琀爀㸀㰀⼀琀搀㸀㰀⼀琀愀戀氀攀㸀㰀⼀戀漀搀礀㸀㰀⼀栀琀洀氀㸀
|