ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:848-2</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Genética e Biologia Molecular ( Divisão N )</b><p align=justify><strong><FONT FACE="TIMES NEW ROMAN, TIMES, SERIF" SIZE=4>IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR DE <EM>COLLETOTRICHUM GLOEOSPORIOIDES</EM>, ISOLADOS DE <EM>PAULLINIA CUPANA</EM> VAR. <EM>SORBILIS</EM>, COM OLIGONUCLEOTÍDEOS ESPÉCIE-ESPECÍFICO.</FONT></strong></p><p align=justify><b>Pedro de Queiroz Costa Neto </b> (<i>UFAM</i>); <b><u>Aline Christien de Figueiredo Rondon </u></b> (<i>UFAM</i>); <b>Gabriela Ferreira Zanette </b> (<i>UFAM</i>); <b>Rozana de Medeiros Sousa Galvão </b> (<i>UFAM</i>); <b>José Odair Pereira </b> (<i>UFAM</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2><P align=justify><FONT face="Times New Roman, Times, serif">Os fungos e bactérias que vivem no interior dos tecidos e órgãos vegetais sem causar danos aparentes aos seus hospedeiros, apresentando interações antagônicas, neutras ou simbióticas com plantas, são denominados microrganismos endofíticos&nbsp;ou simplesmente endófitos. Os microrganismos endofíticos podem ser estudados a partir do seu isolamento, pela observação direta a partir de técnicas de microscopia ou por técnicas moleculares de amplificação de DNA, as quais têm sido utilizadas com sucesso na identificação de espécies de fungos ou linhagens intraespecíficas. Assim, a pesquisa teve como objetivo caracterizar fungos endofíticos do gênero <EM>Colletotrichum, </EM>isolados de guaranazeiro (<EM>Paillinia cupana </EM>H.B.K. var. <EM>sorbilis</EM> (Mart.) Ducke), por meio da técnica molecular de PCR com amplificação pelo oligonucleotídeo CgInt (específico para o gênero) e da região ITS do gene rDNA. Os endófitos foram isolados após descontaminação superficial de folíolos de guaranazeiro aparentemente sadios. Após esporulação, pequenos discos&nbsp;com micélio e esporos foram transferidos para frascos Erlenmeyer contendo 100mL de meio batata-dextrose, em temperatura ambiente por dez dias para crescimento micelial e posterior extração de DNA. A extração de DNA genômico foi realizada pelo método fenol/clorofórmio, utilizando tampão de extração (SDS), NaCl e etanol 100%, etanol 70%, Tris-HCl e EDTA. Na fase de quantificação do DNA, foi estimada a concentração com 2<FONT face=Symbol>m</FONT>L do DNA e 3<FONT face=Symbol>m</FONT>L do tampão da amostra. A quantificação foir ealizada por eletroforese em gel de agarose 0,8%, corado com brometo de etídio, a leitura foi realizada pela intensidade de fluorescência num fotodocumentador de imagnes com luz ultravioleta. A combinação de oligonucleotídeos CgInt (iniciador anverso) e ITS4 (iniciador reverso) foi testada em dezessete isolados para amplificação espécie-específica de <EM>Colletotricum gloeosporioides</EM>, pela técnica de PCR, essa combinação foi eficiente para a maioria dos isolados de <EM>Colletotrichum</EM>, sendo amplificada uma banda de aproximadamente 450 pares de de bases. Não foi observada amplificação para as espécies <EM>Glomerella acutata </EM>(EGF9, EGF12) e <EM>C. boninense </EM>(EGF20). Esse resultado confirma a eficácia do par de oligonucleotídeos espécie-específico para identificação dos isolados de <EM>C. gloeosporioides.</EM></FONT></P></font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;CgInt, Colletotrichum, Fungo endofítico, Genética Molecular, Guaranazeiro</td></tr></table></tr></td></table></body></html>