25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

ResumoID:802-3

Área: Micobacteriologa ( Divisão C )

IDENTIFICAÇÃO RÁPIDA DE LINHAGENS DE MICOBACTÉRIAS PELO MÉTODO DE MULTIPLEX-PCR

Eliane Picoli Alves Bensi (UNICAMP); Alessandra Costa Panunto (UNICAMP); Patricia Costa Panunto (UNICAMP); Priscila Dentini (UNICAMP); Marcelo de Carvalho Ramos (UNICAMP)

Resumo

Introdução: A tuberculose acompanha o homem há muito tempo. Estima-se que cerca de 30% da população mundial esteja infectada por Mycobacterium tuberculosis, sob risco, portanto, de desenvolver a doença. Atualmente, cerca de 125 espécies e 11 subespécies foram descritas como pertencentes ao gênero Mycobacterium. Com exceção do M. leprae, que não cresce in vitro, essas espécies são divididas em dois grupos, as espécies pertencentes ao Complexo M. tuberculosis (CMTB) e a micobactérias não-tuberculosas (MNT). O laboratório de micobacteriologia tem papel importante no controle da doença, fornecendo o resultado rápido da baciloscopia, isolamento e identificação da micobactéria, com o objetivo de orientação correta da utilização dos quimioterápicos para terapêutica e controle da disseminação desse agente. O avanço observado nas técnicas de cultivo e biologia molecular tem propiciado grandes mudanças na rotina destes laboratórios. Reações de amplificação para detecção de partes do genoma, específicas do M. tuberculosis (PCR) também têm sido utilizadas, permitindo a diferenciação de cepas do CMTB e das MNT. Um multiplex-PCR permite que essa diferenciação seja feita em uma única reação.

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Objetivos: O estudo foi realizado com o objetivo de propor um método rápido de diferenciação de cepas do CMTB e das MNTs isoladas de pacientes do Hospital de Clínicas da UNICAMP, Campinas/SP.

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Material e métodos: Foram cultivadas 120 amostras positivas para Mycobacterium spp. em meio Lowënstein Jensen , para extração de DNA genômico e posterior identificação pelo método de Multiplex-PCR, utilizando os primers específicos TB284, TB850, TB11 e TB12.

Resultados: Das 120 amostras cultivadas, 91 (75,8%) foram positivas para Mycobacterium tuberculosis, 28 (23,3%) cepas foram positivas para Mycobacterium spp. e 01 cepa (0,8%) não apresentou crescimento no Lowënstein Jensen .

Conclusão: Os resultados demonstraram que o Multiplex-PCR é um método molecular rápido, eficiente e de baixo custo para a identificação preliminar de cepas do CMTB e outras MNT nos laboratórios clínicos.

Palavras-chave: Mycobacterium tuberculosis, Multiplex-PCR, Identificação

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