ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:781-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Genética e Biologia Molecular ( Divisão N )</b><p align=justify><strong> PERFIL DE CARIÓTIPO ELETROFORÉTICO E MAPEAMENTO GÊNICO DE ISOLADOS BRASILEIROS DE SPOROTHRIX SCHENCKII </strong></p><p align=justify><b><u>Alexandre Augusto Sasaki </u></b> (<i>UNIFESP</i>); <b>Geisa Ferreira Fernandes </b> (<i>UNIFESP</i>); <b>Luciano dos Santos Feitosa </b> (<i>UNICASTELO</i>); <b>Zoilo Pires de Camargo </b> (<i>UNIFESP</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2> <div style="text-align: justify;">Esporotricose é uma micose causada pelo fungo dimórfico <span style="font-style: italic;">Sporothrix schenckii</span>. A doença ocorre, principalmente, em áreas tropicais e sub tropicais, e se manifesta como uma infecção crônica na pele e nos tecidos subcutâneos. Atualmente, há um único estudo sobre cariótipo eletroforético de <span style="font-style: italic;">S. schenckii</span>, em isolados do Japão, assim o objetivo deste trabalho é analisar o perfil eletroforético de dez isolados brasileiros de diferentes regiões e realizar o mapeamento dos genes ITS e Topoisomerase nessas cepas. Para isso, foram feitos a extração de DNA cromossômico das cepas em blocos de agarose (1%), sendo que cada bloco continha 1x10<sup>7</sup> leveduras. Os blocos foram colocados em gel de agarose 0,8% e foi realizada a corrida de eletroforese de campo pulsado (fase 1: 900 seg/24 h; fase 2: 1800 seg/24 h; fase 3: 2700 seg/48 h; fase 4 :3600 seg/48 h; fase 5: 4500 seg/24 h). Após a fotodocumentação do gel corado com brometo de etídio (0,5 µg/ml) as bandas cromossômicas foram transferidas para uma membrana de nylon por capilaridade. Sondas dos fragmentos dos genes ITS e topoisomerase foram marcadas radioativamente com P<sup>32</sup> e colocadas para hibridização com a membrana. As membranas foram lavadas e um filme radiográfico foi exposto com a membrana por 48 horas. Depois, o filme foi revelado e as bandas cromossômicas que acenderam foram comparadas com o gel. O perfil eletroforético das bandas cromossômicas variou de 5 a 7 por isolado. O tamanho do genoma foi calculado através da soma de todas as bandas cromossômicas e está entre 27,7 e 36,6 Mpb. Quatro cepas apresentaram o mesmo perfil eletroforético (EPM 03, EPM 05, EPM 18 e EPM19). As cepas EPM 14, EPM 10 e EPM 20 apresentaram bandas de 8,0, 6,0, 3,5 e 3,0 Mpb em comum. A banda de 6,0 Mpb estava presente em todos os isolados e apenas a cepa EPM 15 não apresentava a banda de 8,0. A sonda ITS hibridizou, principalmente em cromossomos maiores que 5,6 Mpb, com exceção das cepas EPM17 e EPM 10, bandas cromossômicas 3,2 Mpb. O mesmo ocorreu com da topoisomerase, que hibridizou somente em cromossomos maiores que 5,2 Mpb. As diferenças entre os perfis eletroforéticos sugerem que existe polimorfismo cromossômico entre as cepas brasileiras em tamanho e número de bandas cromossômicas. As sondas ITS e topoisomerase hibridizaram predominantemente em bandas cromossômicas de alto peso molecular. </div> </font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Sporothrix schenckii, Eletroforese de campo pulsado, Fungo, Cariótipo eletroforético</td></tr></table></tr></td></table></body></html>