ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:719-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Micologia Médica ( Divisão B )</b><p align=justify><strong><P>AVALIAÇÃO DIFERENCIAL DE PROTEÍNAS EXPRESSAS POR S. PYOGENES QUANDO CRESCIDOS EM ALTA (10<FONT SIZE=1>10</FONT>UFC/ML) E BAIXA (10<FONT SIZE=1>7 </FONT>UFC/ML) DENSIDADE POPULACIONAL</P></strong></p><p align=justify><b><u>Amada Zambrana Coronado </u></b> (<i>IMPPG/UFRJ</i>); <b>Russolina Benedeta Zingali </b> (<i>IBqM/UFRJ</i>); <b>Bernadete Teixeira Ferreira Carvalho </b> (<i>IMPPG/UFRJ</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2><P align=justify>O <EM>S. pyogenes</EM> tem grande importância médica, sendo o principal agente causal de faringite e causador de infecções cutâneas (impetigo, erisipela, celulite), sistêmicas (miosite, fascite necrozante, síndrome do choque tóxico estreptocócico) e de sequelas não-supurativas (febre reumática e glomerulonefrite difusa aguda). Apesar de universalmente sensíveis à penicilina, dados da literatura vem relatando a ocorrência de falhas na terapêutica com essa droga, tanto em quadros de faringite quanto de doenças disseminativas letais. No entanto, foi verificado por nosso grupo que <EM>S. pyogenes</EM> torna-se fenotipicamente resistente a múltiplas drogas com mecanismos de ação diferentes (penicilina, azitromicina, eritromicina, cefalexina, cefaclor, tetraciclina, cloranfenicol e clindamicina) quando crescido em alta densidade populacional (10<SUP>10</SUP> UFC/mL), apesar de previamente sensível a todos esses antimicrobianos (por determinação da concentração mínima inibitória). A hipótese de que um mecanismo de efluxo estivesse sendo ativado nos levou a testar a ação de substâncias inibidoras de bombas. Frente ao CCCP e a cada uma das drogas citadas, vimos que houve reversão do fenótipo para clindamicina e cloranfenicol, demonstrando que a expulsão de pelo menos essas duas drogas seria regulada por mecanismo envolvendo bomba de efluxo. Neste estudo demonstramos que a expressão de proteínas totais de <EM>S. pyogenes</EM> por SDS-PAGE em baixa (10<SUP>7 </SUP>UFC/mL) e alta (10<SUP>10</SUP> UFC/mL) densidade populacional tem um perfil protéico diferencial. A extração dessas proteínas foi feita por diferentes protocolos (com utilização de enzimas e por método mecânico). A identificação inicial por espectrometria de massa em aparelho do tipo TOF-TOF das proteínas expressas diferencialmente nas duas condições levou-nos&nbsp;às seguintes identificações: arginina deiminase, ornitina carbamoiltransferase, streptopain, exotoxina pirogênica, Xaa-His dipeptidase, enolase, gliceraldeído 3-fosfato dehidrogenase e l-lactato dehidrogenase, cujas confirmações estão sendo realizadas através de experimentos adicionais. De modo a compreender melhor esses resultados, foram desenhados <EM>primers</EM> para analisar por RT-PCR a expressão diferencial do RNA correspondente a cada uma dessas proteínas, em baixa e alta densidade populacional. Assim, investigamos o papel destas proteínas&nbsp; neste novo e fascinante mecanismo de resistência, uma vez que este poderia ter importante significado clínico em situações nas quais a bactéria encontrasse condições favoráveis para uma elevada multiplicação celular, como as observadas em pacientes imunocomprometidos, portadores de imunossupressão ou fazendo uso de imunossupressores.</P> <P align=justify>Órgão financiadores: CNPq, FAPERJ e PRONEX.</P> <P align=justify>Palavras-chave: <EM>S.pyogenes</EM>, proteínas, SDS-PAGE, expressão, densidade populacional</P></font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;S. pyogenes, proteínas, densidade populacional, expressão, SDS-PAGE</td></tr></table></tr></td></table></body></html>