25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

ResumoID:696-1

Área: Genética e Biologia Molecular ( Divisão N )

EXPRESSÃO DO PEPTÍDEO TÓXICO JABURETOX DA LEGUMINOSA CANAVALIA ENSIFORMIS NO FUNGO ENTOMOPATOGÊNICO METARHIZIUM ANISOPLIAE

Ângela Junges (CBiot/UFRGS); Anne Helene Souza Martinelli (CBiot/UFRGS); Leonardo Broetto (CBiot/UFRGS); Juliano Tomazzoni Boldo (CBiot/UFRGS); Célia Regina Ribeiro da Silva Carlini (CBiot/UFRGS); Marilene Henning Vainstein (CBiot/UFRGS); Augusto Schrank (CBiot/UFRGS)

Resumo

A capacidade de infectar inúmeros hospedeiros apresentada pelo fungo filamentoso M. anisopliae tornou-o um organismo਀洀漀搀攀氀漀瀀愀爀愀漀攀猀琀甀搀漀搀愀椀渀琀攀爀愀漀瀀愀琀最攀渀漀ⴀ栀漀猀瀀攀搀攀椀爀漀⸀ 䔀猀琀攀昀甀渀最漀  愀最攀渀琀攀 biocontrolador de insetos-praga da agricultura e uma alternativa à utilização਀搀攀瀀攀猀琀椀挀椀搀愀猀焀甀洀椀挀漀猀⸀ 一漀攀渀琀愀渀琀漀Ⰰ 昀漀爀洀甀氀愀攀猀搀愀氀椀渀栀愀最攀洀猀攀氀瘀愀最攀洀愀瀀爀攀猀攀渀琀愀洀 como fator limitante o lapso de tempo decorrido entre a adesão do esporo de M. anisopliae na cutícula de seu਀栀漀猀瀀攀搀攀椀爀漀攀愀攀昀攀琀椀瘀愀洀漀爀琀攀⸀ 唀洀愀搀愀猀洀愀渀攀椀爀愀猀搀攀搀椀洀椀渀甀椀爀攀猀琀攀氀愀瀀猀漀搀攀琀攀洀瀀漀 baseia-se no desenvolvimento de linhagens otimizadas que sejam capazes de matar਀漀栀漀猀瀀攀搀攀椀爀漀攀洀瀀攀爀漀搀漀猀搀攀琀攀洀瀀漀洀攀渀漀爀攀猀⸀ 倀愀爀愀愀琀椀渀最椀爀攀猀琀攀漀戀樀攀琀椀瘀漀漀 presente trabalho propõe a construção de uma linhagem de M. anisopliae expressando o peptídeo entomotóxico Jaburetox, oriundo਀搀攀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀䌀⸀攀渀猀椀昀漀爀洀椀猀㰀⼀猀瀀愀渀㸀⸀ 䐀攀猀琀攀洀漀搀漀Ⰰ 猀攀爀 avaliada a participação deste peptídeo no processo de infecção de M. anisopliae utilizando como hospedeiro਀漀瀀攀爀挀攀瘀攀樀漀洀愀渀挀栀愀搀漀爀搀漀愀氀最漀搀漀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀䐀礀猀搀攀爀挀甀猀瀀攀爀甀瘀椀愀渀甀猀㰀⼀猀瀀愀渀㸀⸀ 倀愀爀愀瀀攀爀洀椀琀椀爀愀攀砀瀀爀攀猀猀漀搀漀瀀攀瀀琀搀攀漀渀漀昀甀渀最漀昀漀椀挀漀渀猀琀爀甀搀漀漀 vetor pTEF_JAB_TtrpC, o qual contém a seqüência nucleotídica referente ao਀瀀攀瀀琀搀攀漀䨀愀戀甀爀攀琀漀砀猀漀戀愀爀攀最甀氀愀漀搀漀瀀爀漀洀漀琀漀爀搀漀最攀渀攀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀琀攀昀ⴀ㄀ⴀ愀氀昀愀㰀⼀猀瀀愀渀㸀攀搀漀琀攀爀洀椀渀愀搀漀爀搀漀最攀渀攀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀琀爀瀀䌀㰀⼀猀瀀愀渀㸀搀攀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀䄀猀瀀攀爀最椀氀氀甀猀 nidulans. Após subclonagem do cassette਀搀攀攀砀瀀爀攀猀猀漀搀攀䨀愀戀甀爀攀琀漀砀渀漀瘀攀琀漀爀戀椀渀爀椀漀瀀倀娀倀㈀　㄀䈀䬀Ⰰ 愀漀洀攀猀洀漀昀漀椀椀渀猀攀爀椀搀漀漀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀挀愀猀猀攀琀琀攀㰀⼀猀瀀愀渀㸀搀攀攀砀瀀爀攀猀猀漀搀漀最攀渀攀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀戀愀爀㰀⼀猀瀀愀渀㸀⸀ 䔀猀琀攀最攀渀攀挀漀搀椀昀椀挀愀甀洀愀 fosfinotricina acetiltransferase, a qual confere resistência à glifosinato de਀愀洀渀椀漀攀瀀攀爀洀椀琀攀Ⰰ 瀀漀爀琀愀渀琀漀Ⰰ 愀猀攀氀攀漀搀攀琀爀愀渀猀昀漀爀洀愀渀琀攀猀⸀ 伀瘀攀琀漀爀瀀倀娀倀开䨀䄀䈀开䈀䄀刀 foi utilizado para transformar células de Agrobacterium਀琀甀洀攀昀愀挀椀攀渀猀㰀⼀猀瀀愀渀㸀䔀䠀䄀㄀　㔀⸀ 䄀瀀愀爀琀椀爀搀愀愀最爀漀琀爀愀渀猀昀漀爀洀愀漀搀攀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀䴀⸀ 愀渀椀猀漀瀀氀椀愀攀㰀⼀猀瀀愀渀㸀昀漀爀愀洀漀戀琀椀搀愀猀㄀㔀㘀挀漀氀渀椀愀猀爀攀猀椀猀琀攀渀琀攀猀愀最氀椀昀漀猀椀渀愀琀漀 de amônio (250ug/mL). Destas, 4 transformantes apresentando sinal de਀愀洀瀀氀椀昀椀挀愀漀瀀漀猀椀琀椀瘀漀昀漀爀愀洀挀甀氀琀椀瘀愀搀漀猀攀洀洀攀椀漀氀焀甀椀搀漀瀀愀爀愀攀砀琀爀愀漀搀攀 proteínas intracelulares. A confirmação dos transformantes foi avaliada pela਀瀀爀攀猀攀渀愀搀漀瀀攀瀀琀搀攀漀渀愀昀爀愀漀椀渀琀爀愀挀攀氀甀氀愀爀搀漀昀甀渀最漀搀攀琀攀挀琀愀搀愀瀀漀爀攀渀猀愀椀漀搀攀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀圀攀猀琀攀爀渀戀氀漀琀㰀⼀猀瀀愀渀㸀Ⰰ 渀漀攀渀琀愀渀琀漀Ⰰ 漀瀀攀瀀琀搀攀漀 ⠀縀㄀㌀䬀䐀愀⤀ parece estar formando agregados com tamanho superior a 30KDa. Através de bioensaios਀挀漀渀琀爀愀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀䐀⸀ 瀀攀爀甀瘀椀愀渀甀猀㰀⼀猀瀀愀渀㸀猀攀爀 愀瘀愀氀椀愀搀愀愀 eficiência de morte das linhagens recombinantes em comparação com a selvagem. Paralelamente,਀昀漀椀爀攀愀氀椀稀愀搀漀瀀漀爀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀䜀攀渀漀洀攀眀愀氀欀椀渀最㰀⼀猀瀀愀渀㸀Ⰰ 漀 isolamento da região promotora e do peptídeo sinal presentes no gene da਀琀爀攀愀氀愀猀攀 挀椀搀愀搀攀㰀猀瀀愀渀猀琀礀氀攀㴀∀昀漀渀琀ⴀ猀琀礀氀攀㨀椀琀愀氀椀挀㬀∀㸀䴀⸀ 愀渀椀猀漀瀀氀椀愀攀㰀⼀猀瀀愀渀㸀⸀ 䔀猀琀攀猀攀氀攀洀攀渀琀漀猀爀攀最甀氀愀搀漀爀攀猀猀攀爀漀甀琀椀氀椀稀愀搀漀猀瀀愀爀愀瀀攀爀洀椀琀椀爀愀攀砀瀀爀攀猀猀漀搀攀 Jaburetox fusionado a um peptídeo sinal de exportação celular e sob regulação਀搀漀瀀爀漀洀漀琀漀爀搀愀琀爀攀愀氀愀猀攀 挀椀搀愀Ⰰ 漀焀甀愀氀  椀渀搀甀稀椀搀漀瀀漀爀琀爀攀愀氀漀猀攀Ⰰ 漀瀀爀椀渀挀椀瀀愀氀 açúcar presente na hemolinfa de insetos.

Palavras-chave: biocontrole, Dysdercus peruvianus, Jaburetox, Metarhizium anisopliae

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