ASSOCIAÇÃO DE MEIOS DE CULTIVO NA BIOPROSPECÇÃO DE BACTÉRIAS DEGRADADORAS DO HERBICIDA 2,4-D.

Ida Carolina Neves Direito (UFRJ); Bernardo Barroso Abbês (UFRJ); Leda Cristina Santana Mendonça-hagler (UFRJ); Andrew Macrae (UFRJ)

A bioprospecção permite a identificação dos microrganismos e o conhecimento sobre as funções desempenhadas por estes no ambiente. As metodologias independentes de cultivo representam um grande avanço nos estudos de biodiversidade, mas é a obtenção de culturas puras que viabilizam a exploração biotecnológica desses organismos. O desenvolvimento de processos de biorremediação de agrotóxicos inicia com a construção de uma coleção de culturas com a capacidade de degradação desses compostos. Nesse trabalho foi empregado o herbicida ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) como modelo de agrotóxico. O objetivo desse trabalho foi verificar a influência do uso de dois meios de cultivo na bioprospecção de bactérias degradadoras do herbicida 2,4-D em solos agrícolas. Foi realizado o isolamento de bactérias envolvidas nos processos de biodegradação do 2,4-D em três solos distintos: solos A e B do Rio de Janeiro e solo C de Goiás. Foram utilizados dois meios de cultura: i) meio seletivo usando o 2,4-D como a única fonte de carbono, e ii) meio diferencial MEMB. O meio diferencial MEMB permite a identificação das colônias de bactérias degradadoras de 2,4-D em função da coloração avermelhada destas. Colônias degradadoras do 2,4-D acidificam o meio e imobilizam eosina B apresentando coloração avermelhada, enquanto colônias não degradadoras apresentam coloração azulada. As placas foram incubadas a 30ºC por 15 dias. Os isolados foram identificados através do seqüenciamento parcial do gene 16S rDNA. Os resultados obtidos não mostraram uma padronização quanto aos grupos isolados ao se utilizar o meio seletivo ou o meio MEMB nos solos A e B, sendo identificadas bactérias gram-positivas de baixo GC, bactérias gram-positivas com alto GC e proteobacterias. O mesmo resultado foi observado ao usar o meio MEMB no solo C. O meio seletivo no solo C permitiu a seleção de bactérias gram-positivas de baixo GC e proteobacterias. Podemos inferir que o meio de cultura usado no isolamento é responsável por restrições na diversidade microbiana das bactérias degradadoras do herbicida 2,4-D. A associação desses dois meios de cultivo é recomendado para a bioprospecção de bactérias degradadoras do herbicida 2,4-D de forma mais eficiente.