25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

ResumoID:628-2

Área: Microbiologia Veterinária ( Divisão G )

DETECÇÃO MICROBIOLÓGICA E MOLECULAR DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS EM AMOSTRAS DE LEITE BOVINO OBTIDAS DE TANQUE DE EXPANSÃO EM PROPRIEDADES DA REGIÃO OESTE DE SANTA CATARINA

Deolinda Maria Vieira Filha Carneiro (UNESP); Marcella Zampoli Troncarelli (UNESP); Patrícia Yoshida Faccioli (UNESP); Bruna Lapenna Sanches Ferreira (UNESP); Paulo Francisco Domingues (UNESP); Helio Langoni (UNESP)

Resumo

A mastite é a afecção mais importante nos rebanhos leiteiros, cujo principal agente é Staphylococcus aureus. A rápida detecção e precisa identificação deste patógeno nos tanques das propriedades leiteiras permite eficiente controle da qualidade e biossegurança do leite. No presente estudo, avaliou-se a acurácia diagnóstica da PCR para a pesquisa de S. aureus em 100 amostras de leite de tanques de expansão de 50 propriedades leiteiras da região oeste de Santa Catarina, em relação ao método de cultivo tradicional, em meio Baird-Parker (BP). Foram cultivados 0,1 mL de cada amostra de leite em placas contendo 20 mL de BP, e posteriormente incubadas em condições de aerobiose à temperatura de 37ºC por até 72 horas, com observação do desenvolvimento microbiano a cada 24 horas. As colônias típicas de S. aureus (circulares, pretas, pequenas, lisas, convexas, rodeadas por uma zona opaca e/ou um halo transparente) foram semeadas em ágar-sangue bovino a 5% e incubadas a 37ºC por 24 horas, para observação de suas características fenotípicas. Realizaram-se as provas da catalase e coagulase lenta, com plasma de coelho, além dos testes de acetoína, maltose e trealose. As estirpes positivas foram classificadas como S. aureus. Com relação à PCR, a extração do DNA a partir das amostras de leite foi realizada utilizando-se Milk Bacterial DNA Isolation Kit (Norgen). Os iniciadores utilizados foram Sa442-1 e Sa442-2, cujo produto de amplificação apresenta 108pb. O método BP detectou 26 amostras positivas para S. aureus, a partir do leite dos tanques de expansão de 21 rebanhos (prevalência de 42%). A técnica de PCR identificou 61 amostras positivas, sendo 14 também positivas pelo BP. A PCR apresentou valores de sensibilidade de 53,8% e especificidade de 36,5%, com limiar de detecção da ordem de 10³ ufc/mL. Apesar das técnicas de biologia molecular terem contribuído, recentemente, em diversos aspectos no diagnóstico da mastite bovina, a busca por iniciadores mais sensíveis e específicos, que possam ser utilizados em amostras de leite individuais ou compostas, ainda torna-se necessária. A utilização dos métodos de cultivo tradicionais deve ser continuamente empregada, para avaliação das novas técnicas, por apresentarem acurácia diagnóstica satisfatória. Agradecimentos ao CNPq pela concessão de bolsa de doutorado e à FAPESP pela concessão de auxílio à pesquisa (Processo 2008/02935-9).

Palavras-chave: gado leiteiro, isolamento, PCR, Staphylococcus aureus, tanque de expansão

਀�