ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:434-1</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Genética e Biologia Molecular ( Divisão N )</b><p align=justify><strong>CARACTERIZAÇÃO DA PROTEÍNA GLICERALDEÍDO-3-FOSFATO DESIDROGENASE DO FUNGO <SPAN STYLE="FONT-STYLE: ITALIC;">METARHIZIUM ANISOPLIAE.</SPAN> </strong></p><p align=justify><b><u>Leonardo Broetto </u></b> (<i>UFRGS</i>); <b>Melissa Landell </b> (<i>UFRGS</i>); <b>Juliana Beringer </b> (<i>UFRGS</i>); <b>Barbára Kunzler </b> (<i>UFRGS</i>); <b>Ângela Junges </b> (<i>UFRGS</i>); <b>Juliano Tomazzoni Boldo </b> (<i>UFRGS</i>); <b>Marilne Henning Vainstein </b> (<i>UFRGS</i>); <b>Augusto Schrank </b> (<i>UFRGS</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2> Glicerladeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH, EC 1.2.1.12) é uma enzima clássica da via da glicólise / gliconeogênese, catalisando a fosforilação oxidativa do substrato gliceraldeído-3-fosfato em 1,3-bifosfoglicerato na presença de NAD+ e fosfato inorgânico. GAPDH desempenha funções importantes em diversoso processo celulares, apresentando outras funções e outras sub localizações celulares não relacionadas à glicólise em uma grande variedade de organismos e microrganismos. Neste trabalho nós descrevemos a análise do perfil eletroforético bidimensional da proteína GAPDH de <span style="font-style: italic;">Metarhizium anisopliae</span>, agente biocontrolador de um amplo espectro de artrópodes, utilizando o anti corpo policlonal&nbsp; contra GAPDH de <span style="font-style: italic;">Paracoccideioide brasiliensis </span>para detecção específica da proteína com o intuito de identificar as suas outras duas possíveis isoformas, uma vez que a sua forma majoritária teve sua identificação já confirmada, para GAPDH, por espectrometria de massas. Foi realizada a expressão heteróloga de GAPDH recombinante de <span style="font-style: italic;">M. anisopliae </span>em <span style="font-style: italic;">Escherichia coli</span> e sua purificação para geração de anti corpos policlonais mais específicos. E afim de localizar a proteína na célula de <span style="font-style: italic;">M. anisopliae, </span>experimentos de imunofluorescência utilizando o anti corpo contra GAPDH de <span style="font-style: italic;">P. brasiliensis </span>foram realizados, e revelaram a presença de GAPDH na superfície da célula fúngica juntamente com a sua presença citosólica. Os experimentos realizados nesta etapa têm como objetivo identificar as outras duas possíveis isoformas de GAPDH de <span style="font-style: italic;">M. anisopliae, </span>totalizando três isoformas e localizar a proteína em uma região celular alternativa a já descrita localização citosólica. Em união estes dados fortalecem a hipótese de que existe uma ou mais de uma outra função para a GAPDH de <span style="font-style: italic;">M. anisopliae.<br><br></span>Órgãos de Fomento:<span style="font-style: italic;"> </span>CNPq, FAPERGS, Projeto Rede Sul de Análise de Genomas, PROCAD, CAPES.<span style="font-style: italic;"><br></span> </font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Metarhizium anisopliae, gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase, eletroforese bidimensional, espectrometria de massas, imunomicroscopia</td></tr></table></tr></td></table></body></html>