Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 1493-2 | ||||
Resumo:Algumas enfermidades podem influenciar negativamente na qualidade do leite e acarretar em gastos onerosos ao produtor. Uma das principais e que causa grande impacto é a mastite, de origem multifatorial, resultado de interações entre hospedeiro, ambiente e patógenos típicos, sendo denominada como a doença mais prevalente e desafiadora em fazendas leiteiras em todo o mundo. Muitos microrganismos estão envolvidos na patogenia da mastite e são capazes de formar biofilme, que se apresenta como uma problemática tanto à saúde dos animais quanto dos seres humanos, pois serve como fonte de contaminação do alimento e disseminação da doença para os outros animais. O objetivo deste estudo foi avaliar a formação de biofilme de Staphylococcus aureus causadores de mastite. Foram avaliadas 22 amostras de S. aureus para verificar a formação de biofilme. As amostras foram ressuspendidas em 5 mL de caldo Brain Heart Infusion em temperatura de 37ºC por 24 horas, após esse procedimento foram padronizadas com solução salina a 0,9% e realizada a leitura em espectrofotômetro Rayleigh UV-1800 Uv-Vis, para que a absorbância estivesse entre 0,08 - 0,13 Ångstrom em comprimento de onda de 625 nm, o que corresponde a 1 - 2 x 108 UFC/ml. Depois foram transferidas para microplacas de poliestireno estéril em poços de 100 microlitros (μL) de Triptona Soja 1% de glicose e 2 μL de cada amostra, que foram levadas a incubação por 37ºC durante 24 horas. Na placa ainda foi realizado controle positivo com Staphylococcus aureus ATCC 6538 e controle negativo com Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, além de um poço em branco somente com TSB. As microplacas foram lavadas com água destilada três vezes, em seguida adicionou-se metanol por 15 minutos, cristal violeta (100 μL) por mais 15 minutos. Posteriormente, lavou-se mais três vezes com água destilada, e finalizou-se com 120 μL de ácido acético glacial para ocorrer a ressuspensão. Quando finalizado, as placas foram lidas em espectrofotômetro Rayleigh UV-1800 Uv-Vis a 605 nm, e consideradas formadoras aquelas que apresentaram leitura maior que 1,629. Como resultado, 13 amostras foram formadoras de biofilme. Assim, é fundamental que sejam adotadas medidas rigorosas de controle de qualidade na produção e processamento de leite, bem como práticas de higienização a fim de mitigar os riscos associados à presença de Staphylococcus aureus formador de biofilme.
Palavras-chave: microrganismos, mastite, vigilância em saúde |