| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 1273-2 | ||||
Resumo:A resistência bacteriana é um problema global de saúde pública e isolados resistentes, como Staphylococcus
aureus meticilina resistente (MRSA), pode ocasionar infecções graves e de difícil tratamento. A pesquisa
de novos agentes antimicrobianos se faz necessária e produtos naturais como peptídeos antimicrobianos
têm sido evidenciados, como a melitina, uma fração do veneno da abelha Apis mellifera, que apresenta ação
antimicrobiana. A melitina pode ter atividade hemolítica e novas estratégias são ideais, como o sinergismo
com antibióticos, visando diminuição das doses dos antimicrobianos. Os objetivos foram avaliar a atividade
antibacteriana da melitina, sua associação com a oxacilina e os antibióticos oxacilina e cefalotina em MRSA
ATCC 33591 e um isolado clínico de MRSA, avaliar a atividade antibiofilme dos produtos que
apresentaram atividade antibacteriana, investigar sua permeabilidade na membrana de MRSA e determinar
sua citotoxicidade. A atividade antibacteriana contra os isolados bacterianos foi realizada de acordo com o
ensaio de microdiluição de resazurina (REMA) para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) de
melitina e oxacilina. O sinergismo da melitina com o antibiótico oxacilina foi testado usando a curva de
sobrevivência. A atividade antibiofilme de melitina, oxacilina e a associação de melitina com oxacilina
(mel+oxa) foram testadas e a ação desses produtos sobre membranas celulares de MRSA foi verificada.
Atividade hemolítica e ensaios de citometria de fluxo avaliando citotoxicidade em células HaCaT
(queratinócitos humanos) foram realizados. A melitina apresentou uma CIM de 5,3 µg/mL para MRSA
ATCC e 4,0 µg/mL para o isolado de MRSA; a oxacilina apresentou CIM de 16 µg/mL para MRSA ATCC
e 8 µg/mL para o isolado. A associação mel+oxa mostrou-se sinérgica e bactericida para ambos MRSA.
Concentrações subinibitórias no valor de 75% da CIM de oxacilina e 75% da CIM de mel+oxa inibiram
cerca de 65% da formação de biofilme para ambos isolados de MRSA. Melitina, oxacilina e mel+oxa
mostraram permeabilidade na membrana celular, aumentaram a condutividade elétrica relativa,
promoveram extravasamento de proteínas, liberação de ácidos nucléicos e causaram efluxo de íons potássio
e fosfato. A taxa de hemólise da melitina em sua CIM foi de 0,2%, enquanto a combinação de mel+oxa em
sua CIM não apresentou hemólise em eritrócitos humanos. Melitina e mel+oxa não causaram apoptose ou
necrose nas células de queratinócitos HaCaT, apresentando porcentagem de apoptose variando de 1,06% a
6,11% sendo não significativas. O tratamento mel+oxa apresentou atividade antibacteriana e antibiofilme
sobre MRSA com uma menor dose dos antimicrobianos, não apresentando hemólise em seu valor de CIM
e sem citotoxicidade em células HaCaT e apresentou ação sobre membrana celular de MRSA. A associação
da melitina com a oxacilina apresenta considerável potencial para desenvolvimento de agentes
antibacterianos ou novos tratamentos contra MRSA Palavras-chave: biofilme, citometria de fluxo, resistência bacteriana, sinergismo Agência de fomento:: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) e Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) | |||||