| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 1069-1 | ||||
Resumo:Infecções do trato urinário (ITUs) constituem uma das infecções mais comuns e um dos principais motivos de consultas médicas e de prescrição de antimicrobianos no mundo. Escherichia coli uropatogênica (UPEC) é a principal causa. UPEC possui inúmeros fatores de virulência que participam da patogênese da ITU, dentre eles a adesina fimbrial FimH, que promove a aderência de UPEC às células epiteliais do trato urinário. Células Vero compreendem a uma linhagem celular derivada de rim de macaco verde africano (Cercopithecus aethiops) que vem sendo bastante utilizada em Bacteriologia para estudos de aderência e invasão bacterianas. O objetivo do presente estudo foi observar o comportamento de aderência de cepas de UPEC, carreando o gene fimH que codifica para a fímbria FimH, e determinar os seus padrões de aderência frente às células Vero, bem como verificar a capacidade dessas amostras de invadir células Vero quando expostas ao antibiótico amicacina. Os experimentos foram realizados em duplicata, em sete amostras clínicas de UPEC isoladas da urina de pacientes ambulatoriais do Rio de Janeiro (354, 366, 368, 397, 422, 423 e 424) e em cepas controle de E. coli (C20 e DH5α). Os testes de aderência foram realizados em cultivo de células Vero, distribuído em placas de 24 poços e analisado em dois períodos de incubação (3 horas e 6 horas). A capacidade invasiva das amostras de UPEC em células Vero foram testadas, conforme metodologia previamente descrita na literatura. Foram observados dois diferentes padrões de aderência de UPEC às células Vero: padrão de aderência agregativa (AA) e um padrão denominado “sem padrão típico de aderência” (SPT) (Tabela 1 e Figura 1). Quanto à capacidade invasiva, as amostras 368 e 423 apresentaram uma elevada taxa invasiva, com 6,4% e 4,76% de invasão, respectivamente; a amostra 424 apresentou uma taxa de invasão próxima de 1% (0,80%), valor considerado significativo com relação à capacidade bacteriana invasiva. As amostras 354, 397 e 422 apresentaram baixo percentual invasivo em células Vero, 0,32%, 0,16% e 0,42%, respectivamente (Gráfico 1); a capacidade invasiva das amostras 366 e 424 apresentou variação de 0,8-12% (Tabela 1). Os resultados sugerem que as amostras de UPEC do estudo além de aderentes às células Vero, apresentam grande habilidade de invadir células Vero como demonstrado no ensaio in vitro. Isso corrobora com o fato de UPEC conseguir persistir no trato urinário através da sua adesão, bem como invadir células estabelecendo o processo de ITU. Palavras-chave: Escherichia coli uropatogênica, Aderência, Invasão, Células Vero Agência de fomento:Faperj | |||||