| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 582-1 | ||||
Resumo:As leishmanioses são antropozoonoses endêmicas em países subdesenvolvidos. A leishmaniose visceral (LV) é considerada a forma mais grave e tem como principal agente etiológico no Brasil, a Leishmania infantum e como vetor, o lutzomyia longipalpis. Destaca-se como enfrentamento: o controle vetorial, diagnóstico e tratamento dos infectados. As limitações dos testes preconizados pelo Ministério da Saúde, como a reatividade cruzada com outros patógenos, baixas sensibilidades e especificidades e dificuldade na detecção de assintomáticos, torna necessário encontrar antígenos mais eficientes. O objetivo do trabalho é avaliar a detecção de anticorpos anti-Leishmania por epítopos lineares e a reatividade cruzada das proteínas rLci1, rLci2 e rLci5 in silico e em laboratório para geração de um teste-rápido baseado nas proteínas como produto final. Por meio do BLAST- p foi investigada a similaridade genética com outros patógenos presentes em coinfecções com LV, que demonstrou similaridade genética com T. cruzi para as proteínas rLci1 e Lci5, embora não tenha sido encontrada similaridade significativa com a rLci5 pelo Clustal Omega. As matrizes de similaridades e identidades foram avaliadas pelo Clustal Omega, que encontrou percentuais de identidade e similaridade para rLci2 e rLc5 apenas dentro do gênero Leishmania. Foram preditos in silico, os epítopos mais imunorreagentes pelo BepiPred, IEDB e BeciPred, A avaliação da reatividade cruzada foi feita por ELISA com uso das proteínas também desnaturadas e conforme o teste de McNemar não houve diferença estatística significativa na sensibilidade e especificidade após a mudança conformacional das proteínas, além de uma provável diminuição na reatividade cruzada com a desnaturação. Foram analisados os dados provenientes de estudos de Microarranjo das proteínas rLcis e criados mapas de calor com possíveis epítopos contra L. infantum, resultando na identificação de três regiões imunorreagentes. Haverá ampliação do painel sorológico canino e avaliação da reatividade cruzada utilizando soros humanos. Portanto, as proteínas rLcis apresentam parâmetros significativos in silico e as regiões imunorreagentes encontradas são excelentes candidatas para compor um antígeno quimérico para o desenvolvimento de um teste-rápido para o diagnóstico da leishmaniose visceral, superando as dificuldades apresentadas atualmente na detecção de infectados para um melhor enfrentamento da doença. Palavras-chave: Diagnóstico sorológico, Leishmania infantum , Proteínas recombinantes Agência de fomento:CNPq, CAPES e FIOCRUZ | |||||