| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 172-1 | ||||
Resumo:O uso de antibióticos para engorda e prevenção de doenças, além do uso indiscriminado pela população humana, vem causando um aumento da resistência antimicrobiana (AMR), e é um problema global. Os esforços para lidar com a disseminação da AMR requerem a adoção de uma abordagem One Health. Para estudar a presença de AMR no ambiente, podemos utilizar espécies bioindicadoras como a tartaruga verde marinha, a Chelonia mydas, que é uma espécie de topo de cadeia alimentar, distribuída globalmente nos trópicos, e que passa a maior parte de sua vida em ambientes costeiros expostas a fatores antrópicos. Nosso objetivo é determinar as bactérias e os genes de resistência antimicrobiana presentes na microbiota intestinal das tartarugas-marinhas de vida livre que se alimentam na Baía de Guanabara, R.J. As tartarugas-verde foram capturadas em três locais da Baía de Guanabara: Charitas, Marina da Glória e Urca (Licença SISBIO: 71913-1). Após a captura intencional dos animais, são coletados swabs da cloaca para cultivo de bactérias e para realização de tipagem por metagenoma e amostras de tecido para análise genética. Também foram feitas coletas de metadados, como comprimento curvilíneo da carapaça, largura curvilínea da carapaça, e peso. O teste de metafenotipagem consiste no crescimento das bactérias em uma placa com os discos de antibióticos: ampicilina, azitromicina, cefalotina, ciprofloxacina, gentamicina, polimixina b, rifampicina, tetraciclina e vancomicina, e posterior isolamento e identificação das espécies por espectrofotometria de massa. Foi possível visualizar a presença de espécies com resistência intrínseca e extrínseca. Ao todo foram isolados 71 UFCs e foi possível a identificação de 44, cinco dos nove antibióticos apresentaram crescimento (AMP, AZI, CEF, POL, TET e VAN), sendo que apenas para tetraciclina que encontramos gêneros bacterianos com resistência extrínseca (Citrobacter e Klebsiella). Estudos mostram a presença desses microrganismos resistentes causando a morte de pessoas. A extração de DNA, amplificação e sequenciamento da região controle do DNA mitocondrial das amostras de tecido foram realizadas. As sequências foram alinhadas e editadas utilizando o Geneious v. 2022.1.1, comparadas com as amostras do banco de dados do Archie Carr Sea Turtle Center, e a rede de haplótipos foi construída no Median Joining Network. Com a análise das sequências de 49 tartarugas, podemos inferir que a maioria dos animais apresentavam haplótipos idênticos ao Cm-A8, que é uma sequência oriunda do Atlântico Tropical Ocidental. A partir das amostras de swab, armazenadas em líquido de preservação, serão ainda analisados o microbioma e o resistoma por meio de sequenciamento de nova geração. Até o momento, podemos concluir que as tartarugas capturadas carregam bactérias resistentes a antibióticos e pertencem, em sua maioria, a áreas de nidificação já conhecidas para essa espécie. A identificação de bactérias de importância médica, que possivelmente apresentem genes de resistência, nos indica que o meio ambiente está contaminado, constituindo, portanto, um problema de saúde pública. Palavras-chave: bactérias resistentes aos antibióticos, saúde única, espécie bioindicadora Agência de fomento:CAPES, CNPq, FAPERJ | |||||