II Simpósio Internacional de Microbiologia Clínica
Resumo:MH-045


Poster (Painel)
MH-045

GENES aggR, aggA, aafA E aap E FORMAÇÃO DE BIOFILME EM ISOLADOS Escherichia coli ENTEROAGREGATIVA DE CRIANÇAS QUILOMBOLAS

Autores:Mariane Vedovatti Monfardini (UFES - Dept. Patologia/UFES) ; Murilo Soares Costa (CEUNES - CEUNES/UFES) ; Isabel Cristina Affonso Scaletsky (UNIFESP - Microbiologia/UNIFESP) ; Liliana Cruz Spano (UFES - Dept. Patologia/UFES)

Resumo

Escherichia coli enteroagregativa (EAEC), o último dos seis patotipos de E. coli diarreiogênica (DEC) descrito, tem emergido como importante patógeno em países desenvolvidos e em desenvolvimento que está associado à diarréia aguda e persistente e também isolado de indivíduos assintomáticos. Este patotipo, caracterizado pela aderência agregativa (AA) em células HEp-2 e em lamínulas livre de células, apresenta grande heterogeneidade genotípica, o que dificulta a caracterização da patogenicidade do isolado. Fímbrias e produção de biofilme na mucosa intestinal são fatores prováveis de virulência dessa bactéria. Este estudo propõe a caracterização genotípica e fenotípica de 69 amostras identificadas como EAEC (AA) de crianças quilombolas com e sem diarréia, do norte do Espírito Santo. PCRmonoplex foi realizado em total de 69 amostras para detecção de genes plasmidiais de virulência aggR (ativador transcripcional), aggA (subunidade fimbrial AAF/I) e aafA (subunidade fimbrial AAF/II). Gene aap (dispersina) foi pesquisado nas amostras positivas para aagR. A capacidade de formação de biofilme foi realizada de 57 amostras de EAEC em microplacas de poliestireno coradas com safranina e classificadas como: (i) Não produtor, (ii) Fraco produtor, (iii) produtor Intermediário e (iv) Forte produtor, conforme OD490nm da cepa padrão EAEC042 e do controle negativo (E2348/69). Os seguintes resultados para genes de virulência foram encontrados: (i) 8,7% (6/69) do regulon aggR; (ii) 79,7% (55/69) de aggA; (iii) aafA não foi detectado nas amostras e; (iv) 50% (3/6) de aap nas amostras positivas para aggR. Nenhuma amostra de EAEC foi considerada como Forte produtora de biofilme e 10,5% (6/57) foram produtoras intermediárias. O fragmento esperado para o gene aggA era de 450 pb entretanto o encontrado foi de 750 pb, sugerindo inserção, que deverá ser analisado por sequenciamento gênico. Conforme presença do regulon aggR, a maioria dos isolados (92,3%) corresponde à EAEC atípica. Destaca-se a alta prevalência observada de aggA e baixa do aggR. A capacidade de produção intermediária de biofilme não foi relacionada a nenhum gene e nem a presença de diarréia na criança. Estes resultados demonstram heterogeneidade entre as amostras de EAEC isoladas de crianças com e sem diarréia dessas comunidades.


Palavras-chave:  E. coli enteroagregativa, Biofilme, Genes de virulência