Resumo

Em bovinos, o ensaio imunoenzimático (ELISA) tem sido aplicado principalmente na identificação de rebanhos infectados e na avaliação da eficácia de vacinas contra um ou vários sorotipos de Salmonella. O antígeno de proteína bacteriana solúvel (sonicado) tem sido cada vez mais utilizado na técnica de ELISA, pois além de propiciar resultados semelhantes aos obtidos com a utilização do lipopolissacarídeo (LPS) e do antígeno flagelar, sua preparação é bem menos laboriosa. Entretanto, não há relatos do uso deste antígeno na detecção da resposta sorológica de bovinos a Salmonella. O objetivo do estudo foi padronizar um ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto, com o emprego de proteína solúvel (sonicado) como antígeno, para avaliar a resposta sorológica contra Salmonella Dublin em bezerros. Para a padronização do teste utilizou-se antígeno constituído de proteína solúvel obtida após sonicação de cultura pura de Salmonella Dublin, amostras de soro de bezerros (referências positiva e negativa) e conjugado imunoenzimático (IgG de coelho anti-IgG bovina). O volume e a diluição ótima dos reagentes foram determinados por meio de titulação em bloco. Para a avaliação da resposta sorológica foram utilizados soros de quatro bezerros da raça Holandesa, com aproximadamente 75 dias de idade, imunizados com duas doses de vacina comercial contra salmonelose bovina, administradas por via subcutânea, com intervalo de quatro semanas. Foram colhidas amostras de sangue venoso imediatamente antes da vacinação e aos 15, 30, 45 e 60 dias após a imunização. Os resultados obtidos mostraram que a diluição ideal do antígeno sonicado de Salmonella Dublin foi de 1/10.000 e as diluições ideais dos soros sanguíneos e do conjugado imunoenzimático foi de 1/1.000. Nestas condições o ELISA foi capaz de detectar resposta sorológica para Salmonella Dublin no soro dos bezerros vacinados contra salmonelose.