Resumo

Introdução: Rhodotorula spp. está amplamente distribuída no ambiente e pode colonizar diferentes sítios no homem, além de causar infecções de corrente sanguínea. Apenas três espécies têm sido relacionadas a infecções: R. mucilaginosa, R. glutinis e R. minuta. Este patógeno emergente acomete principalmente pacientes com cateter venoso central e imunossuprimidos, além de apresentar resistência intrínseca a fluconazol e baixa sensibilidade a equinocandinas. Portanto, a identificação correta do gênero e espécie do agente da infecção fúngica é importante para auxiliar na escolha terapêutica mais adequada. Existe dificuldade na identificação fenotípica das espécies deste gênero devido à grande variabilidade encontrada no teste de assimilação de carboidratos. Portanto, faz-se necessário a utilização de ferramentas moleculares para a identificação acurada das espécies. Objetivos: Identificar espécies de Rhodotorula utilizando sequenciamento da região ITS do rDNA e avaliar o poder discriminatório do método RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA), usando diferentes primers para diferenciar estas espécies. Materiais e métodos: Foram analisados 60 isolados clínicos de Rhodotorula spp. coletados entre os anos de 1995 e 2010, sendo que 48 destes são provenientes de hemoculturas e 12 de outros sítios, e as cepas referência de R. mucilaginosa, R. glutinis e R. minuta. Dentre as 60 cepas estudadas, 4 foram fenotipicamente identificadas como R. glutinis e 56 como R. mucilaginosa. Após extração de DNA genômico, foi realizado sequenciamento da região ITS do rDNA. As sequências consenso foram analisadas por comparação em banco de sequências de DNA para identificação de espécie. No RAPD, foram utilizados os primers B14 e M2, e a interpretação dos resultados foi feita por dendrograma, que utiliza a similaridade dos padrões de bandas das amostras para a formação de grupamentos. Resultados e discussão: Através de sequenciamento da região ITS, as 4 cepas identificadas fenotipicamente como R. glutinis, foram identificadas como Rhodosporidium fluviale (1), Rhodotorula dairenensis (1) e Rhodosporidium diobovatum (2). Dentre as 56 cepas fenotipicamente identificadas como R. mucilaginosa, uma foi identificada como R. dairenensis, duas como R. minuta, e o restante como R. mucilaginosa. A análise dos dendrogramas gerados a partir do RAPD eficientemente agrupou, por espécies, os isolados estudados. Conclusões: 1. RAPD pode ser uma ferramenta útil como screening para a identificação de espécies patogênicas de Rhodotorula. 2. Métodos moleculares são necessários e adequados para a identificação acurada de espécies deste gênero.