Resumo

Introducão: Streptococcus mutans é o principal patógeno da cárie dentária e está comumente envolvido na endocardite bacteriana. Como diversos patógenos bacterianos, S. mutans utiliza sistemas reguladores de transcrição de dois componentes (SDC) para se adaptar a condições de estresse e expressar fatores de virulência durante a infecção do hospedeiro. A proteína reguladora CovR  compõe um dos SDC conservado em diversos patógenos do gênero Streptococcus. Objetivo: Investigar o efeito da inativação de CovR na sobrevivência de S. mutans em saliva e em sangue humanos. Material e métodos: Os padrões de viabilidade e crescimento da cepa S. mutans UA159 e respectivo mutante covR (UAcovR) foram comparados em amostras de saliva e sangue de quatro voluntários saudáveis. Para isto, UA159 e UAcovR foram cultivadas (37^oC, 10% CO2) em Meio Quimicamente Definido (MQD) ou MQD com 10 ug/ml de eritromicina (erm), respectivamente, até a fase exponencial de crescimento (A550nm=1,0). Bactérias de 20 ml destas culturas foram separadas por centrifugação e ressuspendidas em amostras de saliva estéril (20 ml) ou diluídas 1:1 em sangue.  Após incubação sob as mesmas condições por períodos de 0, 3, 12, 24, 48 e 72 h, alíquotas das suspensões foram diluídas, sonicadas para rompimento das cadeias e cultivadas em placas com agar BHI acrescido ou não de erm, para determinação dos números de células viáveis (UFC/mL). Três experimentos independentes foram realizados por amostra de cada voluntário. Resultados: A viabilidade de UAcovR  em saliva foi muito inferior à de UA159 a partir de 48h de exposição às salivas dos voluntários; em 92 h de exposição, uma redução média de 2 vezes foi observada no log de UFC/mL em UAcovR em relação à cepa selvagem (Mann-Whitney, p<0.05). Reduções significativas também foram observadas em UAcovR exposta ao sangue de 3 dos quatro voluntários, a  partir de 24 h de exposição (redução média de 1 log em UFC/mL comparado à UA159).  Conclusão: A inativação de CovR afeta significativamente a viabilidade de S. mutans em saliva e em sangue  humanos, indicando importância deste regulador na capacidade de S. mutans em causar infecções bucais e sistêmicas.