Resumo

Aeromonas são bacilos gram negativos que podem ser encontrados em diversos ambientes aquáticos incluindo água potável, e também em uma grande variedade de alimentos. Essas bactérias são capazes de causar diversas infecções em humanos incluindo bacteremia, diarréia e infecção de feridas, entre outras. As infecções causadas por Aeromonas podem ser adquiridas através da ingestão de alimentos e água contaminados, e também por contato direto de pequenos ferimentos com água contaminada. A patogênese das Aeromonas é complexa, e diversos genes associados com virulência são reconhecidos atualmente. O objetivo deste trabalho é investigar a presença do gene alt, que codifica a enterotoxina citotônica termo lábil, e dos genes stx₁ e stx₂ que codificam respectivamente, as toxinas Shiga tipo 1 e 2, em estirpes de Aeromonas isoladas no Paraná a partir de amostras de sangue e de fezes. Foram analisadas 59 estirpes de Aeromonas previamente identificadas e mantidas na Bacterioteca do Laboratório de Bacteriologia Clínica da UFPR. As bactérias foram cultivadas em ágar triptona de soja a 36±1^oC por 18-24 horas. A extração do DNA foi feita pelo método da fervura, e a detecção dos genes de virulência por PCR. As reações de PCR foram realizadas em volume final de 25 µL contendo 20ng de DNA, tampão da Taq 1X, MgCl₂ 1,5mM, dNTP 0,2 mM, oligonucleotídeos iniciadores específicos para cada um dos genes na concentração de 10pmol, Taq DNA Polimerase 1U. O programa utilizado foi 1 ciclo de 94^oC por 4’ seguido de 30 ciclos de 94^oC por 1’, 55^oC por 30’’, 72^oC por 30’’ e um ciclo de 72^oC por 10’. A detecção dos produtos de PCR foi realizada por eletroforese em gel de agarose a 2% em TBE 1X e a corrida eletroforética a 35V por 3 horas. Os géis foram corados com brometo de etídeo e visualizados em transiluminador UV. Não houve amplificação dos fragmentos de DNA de tamanhos esperados em nenhuma das estirpes analisadas, diferente do observado nos controles. Esses resultados indicam que os genes alt, stx₁ e stx₂ não estão presentes nas estirpes de Aeromonas analisadas. A virulência das Aeromonas é multifatorial, e a distribuição dos genes de virulência entre as estirpes é heterogênea. A presença de outros genes de virulência está sendo investigada para caracterizar essas estirpes quanto ao grau de patogenicidade. Apoio: Fundação Araucária.