Resumo

Introdução: A resistência aos carbapenêmicos, entre outros mecanismo, é devida principalmente à produção de beta-lactamases denominadas carbapenemases. Uma das carbapenemases de crescente importância em enterobactérias é a Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC), uma beta-lactamase da classe A de Ambler, que hidrolisa todos os antibióticos beta-lactamicos. Objetivo:Ivestigar o mecanismo de resistência aos carbapenêmicos da linhagem Klebsiella pneumoniae Franca-1 isolada de um paciente atendido ambulatorialmente na cidade de Franca-SP. Material e Métodos: A bactéria foi isolada de urina, de um paciente atendido ambulatorialmente com infecção urinaria recorrente, e que já havia usado nitrofurantoína e sulfametoxazol-trimetoprim de uso prolongado. A identificação bacteriana foi realizada por testes bioquímicos convencionais e o perfil de sensibilidade determinado por disco-difusão. Em adição, a investigação fenotípica foi realizada por Etest ^R para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) de imipenem, meropenem, ertapenem e teste de Hodge modificado para a detecção de da produção de carbapenemases. A investigação molecular foi realizada por PCR para a amplificação de genes codificadores de carbapenemases e outras beta-lactamases, seguida de sequenciamento dos genes amplificados, análise do ambiente genético em que estão inseridos e, avaliação, por conjugação, da transferibilidade dos genes identificados. Resultados e Discução: Por teste de disco difusão a bactéria presentou sensibilidade somente à ciprofloxacino, levofloxacino, tigeciclina e polimixina. As CIMs obtidas foram maior ou igual a 32 mcg/mL para o carbapenêmicos testados. O teste de Hodge modificado foi positivo, indicando a produção de carbapenemase . O gene ^bla_KPC-2 foi identificado e flanqueado  pelas sequências de inserção ISKpn7 e ISKpn6, demonstrando que este determinante de resistência está, provavelmente localizado no transposon tn4401, como previamente reportado. Foi obtido transconjugante com com fenótipo de resistência a todos os beta-lactâmicos, demonstrando a capacidade de transmissão e disseminação do gene ^blaKPC-2 por plasmídeo. Conclusão: O mecanismo responsável pela resistência aos carbapenêmicos na linhagem de Klebsiella pneumoniae Franca-1 foi a produção de carbapenemase KPC-2 codificada pelo gene  ^blaKPC-2 que esta localizado em plamídeo transferível.