Resumo

Enterococcus faecalis e E. faecium são espécies clinicamente importantes, pois adquirem genes que modificam a parede celular, tornando-as resistentes aos glicopeptídeos. Há pelo menos 6 fenótipos de resistência sendo que VanA, VanB, VanD contém genes que alteram a porção final do peptídeo da parede celular de D-Alanina-D-Alanina para D-Ala-D-Lactato; e VanC, VanG e VanE contêm genes que alteram para D-Ala-D-Serina. A maioria dos VRE no Brasil é do fenótipo VanA, com alta resistência à vancomicina e teicoplanina, codificada pelos genes do Tn1546. Estes podem ser transferidos intra e interespécies por plasmídeos conjugativos ou de maneira clonal. Os objetivos foram identificar as espécies de 62 VRE isolados durante o programa de vigilância em um hospital mineiro, determinar a presença do gene vanA e/ou vanB e caracterizar o transposon envolvido na resistência à vancomicina. Foram identificados 47 E. faecium e 15 E. faecalis por multiplex-PCR com primers espécie-específicos. A presença do gene vanA foi confirmada por PCR. Foi detectada a presença de elementos de inserção/deleção nos transposons por Long-PCR para amplificação dos genes vanRSHAX responsáveis pela resistência. Todas as amostras de E. faecalis possuem tais genes intactos. No entanto, todos os E. faecium apresentaram inserção de ~1,5 kb nesta região a qual foi analisada por RFLP (restriction fragment lenght polymorphism). Comparações com amostras do país sugerem a presença do Elemento de Inserção (IS) IS1251, devido ao perfil do RFLP ser idêntico ao da linhagem E. faecium RJ-1, descrita em 2004 contendo o IS1251 entre os genes vanS e vanH. Inserção de IS pode alterar a expressão do gene consecutivo, além de poder ser um marcador epidemiológico em países onde a prevalência de IS no transposon é baixa.  Nos EUA, inserção do IS1251 na região do transposon descrita é comum, porém no Brasil ainda é rara, portanto, pode ser utilizado como marcador. Ainda é preciso verificar a presença de uma ou mais linhagens em cada espécie. No entanto, a presença deste IS somente em amostras da espécie E. faecium permite afirmar que neste hospital há pelo menos duas origens diferentes deste transposon: uma em E. faecium e outra distinta em E. faecalis. Além disso, com a presença deste marcador, será possível rastrear a possível disseminação do transposon entre linhagens diferentes.